Учебные материалы по медицине

Балашова Е.В., Пулина Г. А.,  Ben Khalifa M, Лядов  К.В.

 

 

Рождение здоровой девочки после экстракорпорального оплодотворения и цитоплазматической инъекции сперматозоида, полученного из криоконсервированнной тестикулярной ткани, замораживание которой состоялось через 58 часов после внезапной смерти мужчины.

 

ФГУ «Лечебно-реабилитационный центр Росздрава»

(Директор – чл.-корр.РАМН, проф. Лядов К.В.)

      

Ключевые слова: посмертное извлечение спермы, тестикулярная ткань, апоптоз.

 

      В зарубежной научной медицинской литературе имеется описание  небольшого количества случаев посмертного извлечения  сперматозоидов   для  последующего оплодотворения.  При этом в данную группу случаев попали так же пациенты  до терминальной стадии, находившиеся на аппаратной поддержке, обеспечивающей гемоциркуляцию и адекватную оксигенацию органов и тканей, с прекратившим работу головным мозгом. После терминальной стадии,  главное значение имеет временной интервал между смертью и извлечением спермы и/или яичек, с придатками, или без них.

Для получения  живых и подвижных сперматозоидов после смерти, зарубежные авторы выделяют 24 часовой рубеж, после которого получение сперматозоидов,  пригодных для оплодотворения проблематично ввиду фатального посмертного  нарастания повреждений репродуктивных органов. ( 1,2,3,4,5)

      Описываемый нами клинический случай демонстрирует возможность более позднего использования сперматозоидов для успешного оплодотворения. 

     19 сентября 2006 года  в Центр  планирования семьи и репродукции  ФГУ «Лечебно-реабилитационного центра Росздрава» обратились жена и мать погибшего в автомобильной катастрофе мужчины с просьбой определить наличие и оценить пригодность для последующего оплодотворения  сперматозоидов в  яичках, находящихся в криоконтейнере. При этом, они сообщили, что патоморфолог   поместил яички в морозильную камеру через 58 часов после гибели их родственника. В действительности, привезенный материал представлял собой удаленные единым блоком яички с придатками и проксимальными отделами семявыносящих протоков.

     Нами был произведен скол одного фрагмента для предварительного анализа, остальной же материал был пемещен в криохранилище. Во время прямой  микроскопии, после оттаивания фрагмента и приготовления  слайдов, среди тестикулярных клеток были обнаружены морфологически нормальные  сперматозоиды. Эти сперматозоиды были выделены из ткани и изучены.

      Проведенный нами анализ Vital-screen показал наличие живых сперматозоидов – 2%, индекс дисперсии ДНК составил 47 %,  а процент сперматозоидов, подвергшихся апоптозу – 68. Данные результаты трактовались нами, как неблагоприятные для оплодотворения.

     Жена и мать погибшего, ознакомившись с результатами наших исследований, настаивали на подготовке к экстракорпоральному оплодотворению и проведении этой процедуры с использованием сперматозоидов из криоконсервированной тестикулярной ткани, несмотря на наши разъяснения.

     1 ноября была начата подготовка  женщины к ЭКО. В ходе обследования была выявлена хроническая ановуляция на фоне гиперпролактинемии, гиперплазия эндометрия, ожирение 3 степени. После гистероскопии и раздельного лечебно-диагностического выскабливания , в феврале 2007 на фоне редукционной диеты, была предпринята попытка стимуляции суперовуляции  по длинному протоколу  препаратами Менопур, в ежедневной дозе 300 ЕД в течении 10 дней  на фоне Диферелина 3,75 мг. Данный цикл был отменен в связи с отсутствием ответа яичников на стимуляторы. На фоне метформина в дозе 800 мг дважды в день,  верошпирона по 250 мг 4 раза в день, проведена стимуляция овуляции кломифен цитратом в суточной дозе 100 мг  и менопуром в суммарной дозе  1350 ЕД получено 3 фолликула. 23 марта 2007 года нами была произведена трансвагинальная пункция яичников  и в асперированной фолликулярной жидкости обнаружен 1 ооцит, по морфологическим оценкам cumulus  и после денудации – Grade I  качества. В этот же день был произведен еще один скол фрагмента яичка, изъятого из криохранилища. Мы старались отколоть фрагмент ближе к придатку яичка, для возможного получения, если повезет,  хотя бы одного подвижного сперматозоида. После оттаивания и изучения всех измельченных порций, мы обнаружили 2  подвижных сперматозоида, один из которых был морфологически нормальный. После ИКСИ и поэтапного культивирования в модифицированной среде BlastAssist System (MediCult) 28 марта 2007 года был произведен перенос бластоцисты  Grade I в полость матки.                              

 

     Наступившая беременность протекала  с угрозой прерывания в 1 триместре и фетоплацентарной недостаточностью во 2 и 3 триместре, что потребовало назначения поддерживающей беременность        (прогинова,  утрожестан,  дюфастон, дексаметазон, парлодел)  и улучшающей плацентарный кровоток (курантил, тромбо-асс 50, клексан  0,4) терапии. На 37 неделе, путем кесарева сечения,  родилась девочка весом 3070,0, длина – 51 см. и оценкой по шкале Апгар 8 сразу после рождения,  и через 5 минут – 9 баллов. 

 

 

 

 

 

1.Arnold M.Belker  Live birth after sperm retrieval from a moribund man. Fertil Steril 2001; 4; 841-843.

2.Shefi S et al Posthumous sperm retrieval: analysis of time interval to harvest sperm. Human Reproduction 2006;11;2890-2893. 

3.Bahadur G. Death and conception. Human Reproduction 2002;10;2769-2775.

4.Landau К Posthumous sperm retrieval  for the purpose of later insemination or IVF in Israel: an ethical and psychosocial critique. Human Reproduction 2004;9;1952-1956.

5.Check M et al Sperm extracted and cryopreserved from testes several hours after death results in pregnancy following frozen embryo transfer: case report. Arch Androl 1999:43:235-237.

 

 

Birth of a healthy girl resulting from an intracytoplasmic sperm injection of posthumous sperm retrieval from testicular tissue cryopreserved 58 hrs after the sudden man’s death.

Balashova E., Pulina G., Benkhalifa M., Lyadov K.

 

Abstract: First case report in Russia of a live birth after ICSI using posthumously extracted sperm from en-block excision of testis were cryopreserved in 58 hrs after death. The sperm analyze for fragmentation  index after extraction from testicular tissue was performed.

Key words: posthumous sperm retrieval, testicular tissue, testicular tissue, fragmentation  index.