Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Геноцид собственного народа или зеленская чума 21 века 2024-04-27
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
Картинка недели
Указы СССР 1917-1992
Категории
Методические указания по определению эфаля этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты в растительных культурах, продуктах их переработк
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 652
Материал приурочен к дате: 1991-07-29
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1991-07-29 Материалы за: Год 1991
Автор: Мета Гость
Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6132-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭФАЛЯ (ЭТИЛФОСФИТА АЛЮМИНИЯ И ФОСФОРИСТОЙ
КИСЛОТЫ) В РАСТИТЕЛЬНЫХ КУЛЬТУРАХ, ПРОДУКТАХ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ,
ВОДЕ, ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Эфаль - смесевой препарат;
(I) трис-О-(этилортофосфит)алюминия
O М.м. 345,0.
││
(C H O_PO_) Al C H AlO P .
2 5 │ 3 6 18 9 3
H
(II) фосфит алюминия
AlPO М.м. 106,0;
3
(III) фосфористая кислота
H PO М.м. 82,02.
3 3
Эфаль - 66,6% к.э. - вязкая прозрачная жидкость, хорошо растворима в воде. Компоненты препарата I, III в воде растворимы, II - трудно растворимы; в органических растворителях - практически не растворимы.
МДУ эфаля в растительных культурах (огурцы, виноград) - 0,5 мг/кг, ПДК в воде - 0,3 мг/л.
2. Методика определения эфаля (этилфосфита алюминия
и фосфористой кислоты) в растительных культурах,
продуктах их переработки, воде, почве методом
газожидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении эфаля из исследуемого объекта водой, концентрировании и последующем определении методом реакционной газожидкостной хроматографии в виде метилпроизводных.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Метрологическая характеристика метода определения этилфосфита алюминия в растительных культурах, вине, виноградном соке, воде, почве приведена в таблице.
Таблица
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФАЛЯ
(ЭТИЛФОСФИТА АЛЮМИНИЯ И ФОСФОРИСТОЙ КИСЛОТЫ) В РАСТИТЕЛЬНЫХ
КУЛЬТУРАХ, ПРОДУКТАХ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ, ВОДЕ, ПОЧВЕ
┌───────────┬─────────────┬───────────────────────────────────────────────────┐
│Исследуемое│Исследуемый │ Метод ГЖХ │
│ соединение│ объект ├────────────┬────────────┬───────────┬─────────────┤
│ │ │ предел │ среднее │стандартное│доверительный│
│ │ │обнаружения,│ значение │отклонение,│ интервал │
│ │ │мг/кг, мг/л │определения,│ % │ среднего, % │
│ │ │ │ % │ │ │
├───────────┼─────────────┼────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┤
│Этилфосфит │вода <1> │0,01 │82 │8,5 │10,4 │
│алюминия │почва <1> │0,1 │74 │7,1 │9,6 │
│ │растительные │ │ │ │ │
│ │культуры: │ │ │ │ │
│ │огурцы, │ │ │ │ │
│ │виноград <1> │0,1 │75 │8,4 │11,2 │
│ │хмель <2> │0,4 │75 │7,0 │6,5 │
│ │вино <1> │0,2 - 0,5 │78 │6,8 │8,7 │
│ │ │ │ │ │ │
│Фосфористая│вода <1> │0,01 │79 │5,9 │7,5 │
│кислота │почва <1> │0,1 │75 │7,7 │10,3 │
│ │растительные │ │ │ │ │
│ │культуры: │ │ │ │ │
│ │огурцы, │ │ │ │ │
│ │виноград <1> │0,1 │77 │9,9 │12,8 │
│ │вино <1> │0,2 - 0,5 │76 │7,1 │9,3 │
└───────────┴─────────────┴────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┘
--------------------------------
<1> ВНИИГИНТОКС.
<2> НИПТИХ.
2.1.3. Избирательность метода
Условия экстракции и последующего газохроматографического определения эфаля (этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты) позволяют избирательно определять препарат в присутствии фосфорорганических и пестицидов других групп.
2.2. Реактивы и материалы
Ацетонитрил ч, ТУ 6-09-3534-82.
Метилгликоль (метилцеллозольв) чда, МРТ 6-09-6347-69.
Гидразингидрат чда (или паратолилсульфометилнитрозамид чда).
Кали едкое ч, ГОСТ 9285-78.
Хлороформ хч, ГОСТ 20015-74.
Кислота уксусная (ледяная) осч, ГОСТ 18270-81.
Кислота серная хч, ГОСТ 4204-77, 20-процентный раствор.
Триэтиламин, МРТУ 6-09-6347-63.
Метанол хч, ГОСТ 6995-77.
Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6262-79.
Азот в баллоне особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Водород в баллоне, ГОСТ 3022-80.
Воздух из баллона, ГОСТ 9-010-80, или нагнетаемый компрессором.
Неподвижная фаза - 15% карбовакс 20М на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм).
Этилфосфит алюминия хч.
Фосфористая кислота хч.
Основные стандартные растворы (ОСР) этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты с концентрацией по 100 мкг/мл готовят взятием навески каждого вещества 10 мг (0,0100 г) хч и растворением в дистиллированной воде в мерных колбах емкостью 100 мл. Хранить в холодильнике не более 10 дней. Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл, 5 мкг/мл, 2 мкг/мл готовят разбавлением ОСР водой. Хранить не более 2 дней.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Газовый хроматограф серии "Цвет" или аналогичный с пламенно-фотометрическим (фосфорным) детектором (ПФД) или пламенно-ионизационным (ПИД).
Колонки стеклянные длиной 1 м и 2 м, диаметр 3,5 мм.
Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Колбы грушевидные (круглодонные) вместимостью 500 мл, 250 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 и 10 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические вместимостью 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Пипетки на 0,1; 0,2; 1,0; 5,0; 10,0 мл, ГОСТ 1770-74.
Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ 5Е-2.833.0.24.
Прибор для получения диазометана (рис. 1 - не приводится):
- колба круглодонная трехгорлая, ГОСТ 25336-82, емкостью 500 мл на шлифах, ГОСТ 9737-70 (реакционный сосуд);
- холодильник Либиха на шлифах;
- делительная воронка на шлифе (капельница);
- П-образный переходник на шлифах;
- капилляр.
2.4. Подготовка и определение
2.4.1. Отбор проб
Отбор, хранение и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 2051-79 от 21.08.79.
2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ
Колонку заполняют стандартной фазой (15% карбовакс 20 М на хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (50 мл/мин.) и постепенно поднимая температуру от 100° до 150°. Затем колонку присоединяют к детектору.
2.5. Описание определения
2.5.1. Экстракция
Вода <1>. 200 мл анализируемой пробы помещают в круглодонную
колбу емкостью 500 мл и упаривают в вакууме водоструйного насоса
(вакуум 10 - 30 мм рт. ст., температура бани 45 °C) до 40 - 50
мл. Оставшуюся воду переносят в колбу для отгонки емкостью 100 мл
и упаривают при тех же условиях на 2 - 4 мл. Переносят в мерную
пробирку, измеряют объем (V) и отбирают аликвоту 0,1 мл (V ) для
2
метилирования и дальнейшего ГЖХ-анализа.
В случае если используемый водоструйный насос не дает
соответствующего вакуума, можно основную часть пробы
сконцентрировать замораживанием. Колбу емкостью 500 мл, содержащую
200 мл воды, присоединяют к ротационному испарителю и помещают ее
в баню с мелко раздробленным льдом с солью (10:3) <*>. Вращают
колбу на ротационном испарителе (без подключения вакуума), чтобы
вода в колбе начала кристаллизоваться. Кристаллизацию проводят до
тех пор, пока в колбе останется 40 - 50 мл воды. Оставшуюся воду
переносят в отгонную колбу емкостью 100 мл и концентрируют на
ротационном испарителе под вакуумом до 2 - 4 мл при нагреве бани
не более 45 °C. Переносят остаток в мерную пробирку, измеряют
объем (V ) и отбирают аликвоту (0,1 мл) на газохроматографический
1
анализ.
--------------------------------
<*> Примечание: Приготовленную смесь лед с солью можно
повторно замораживать и использовать ее многократно.
Растительные продукты:
Овощи, фрукты <1>. Из измельченного образца исследуемого
продукта отбирают на анализ 100 г, заливают 100 мл воды,
подкисленной предварительно уксусной кислотой до pH = 5, и
экстрагируют 30 мин. на аппарате для встряхивания. Фильтруют в
мерный цилиндр через фильтр "красная лента" (желательно под
вакуумом) 50 мл пробы (соответствует P = 25 г пробы). Переносят
экстракт в колбу для отгонки и отгоняют воду под вакуумом при
температуре бани не более 45 °C до 2 - 2,5 мл. Измеряют точно
объем сконцентрированной пробы (V ), отбирают 0,2 мл, переносят в
1
мерную пробирку и доводят до 2 мл смесью растворителей
метилгликоль - ацетонитрил (1:1). Полученную смесь либо переносят
в центрифужную пробирку и центрифугируют при 3000 об./мин. в
течение 15 минут, после чего отбирают в градуированную пробирку
для дальнейшего метилирования 1 мл центрифугата, либо фильтруют
через небольшой бумажный фильтр "красная лента" и также отбирают в
градуированную пробирку для метилирования точно 1 мл смеси, что
соответствует аликвоте 0,1 мл (V ) сконцентрированного (V )
2 1
экстракта.
Хмель <2>. Из измельченного образца отбирают на анализ 25 г.
Препарат из образца экстрагируют смесью растворителей метилгликоль
и ацетонитрил (1:1) трижды по 50 мл, каждый раз встряхивая колбу
по 10 минут на аппарате для встряхивания, давая пробе немного
отстояться. Экстракт сливают через безводный сульфат натрия в
колбочку для отгонки растворителя. Отгонку ведут под вакуумом 10 -
15 мм рт. ст. при температуре бани не более 40 °C. Растворитель
отгоняют до небольшого объема. Затем собирают раствор
количественно в мерную колбу емкостью 50 (V ) мл и доливают до
1
метки ацетонитрилом. Из раствора отбирают 5 (V ) мл для
2
метилирования и дальнейшего газохроматографического определения.
Вино, виноградный сок. Этим способом может быть проведен анализ эфаля в спелом винограде. 100 г винограда гомогенизируют в миксере, переносят пробу в центрифужные пробирки и центрифугируют 3 - 5 мин. при 3000 об./мин. Сок отделяют от мякоти декантацией и измеряют объем (100 г ягод дают 70 - 80 мл сока) <*>.
--------------------------------
<*> Конечный объем при упаривании зависит от сорта вина, сока. При упаривании крепленых вин, сладких соков до 2 мл может образоваться остаток в виде карамели, поэтому их упаривают до объема 5 мл.
Вариант 1 <1> - 10 мл вина, виноградного сока упаривают под
вакуумом (10 - 30 мм рт. ст.) водоструйного насоса (температура
бани не более 45 °C) до 2 - 5 мл <*>. Измеряют точно объем
сконцентрированной пробы (V ), отбирают 0,2 мл и далее поступают,
1
как описано при анализе овощей и фруктов.
--------------------------------
<*> Конечный объем при упаривании зависит от сорта вина, сока.
При упаривании крепленых вин, сладких соков до 2 мл может
образоваться остаток в виде карамели, поэтому их упаривают до
объема 5 мл.
Вариант 2 <3> - 25 мл вина или виноградного сока вливают в
круглодонную колбу на 250 мл, добавляют 100 мл метилгликоля и 1 мл
триэтиламина. Смесь упаривают на ротационном испарителе при
температуре 40 °C и давлении 20 мм рт. ст. до объема 25 мл. Этот
раствор количественно переносят в мерную колбу на 50 мл (V ) и
1
доводят до метки ацетонитрилом. Содержимое колбы перемешивают и
фильтруют через бумажный фильтр для удаления нерастворимых
веществ. Из фильтрата отбирают 5 (V ) мл для метилирования.
2
Почва <1>. К 100 г воздушно-сухой почвы приливают 70 мл хлороформа и 70 мл воды. Встряхивают пробу на аппарате для встряхивания 30 минут. Дают 15 минут отстояться. Сливают жидкую фазу, фильтруя под вакуумом на воронке Бюхнера через фильтр "красная лента". К остатку в колбе прибавляют 50 мл хлороформа и 30 мл воды, энергично встряхивают и фильтруют, как описано выше. Фильтрат переносят в делительную воронку и отбрасывают нижний хлороформный слой. Водную фазу переносят в колбу для отгонки и концентрируют до 10 мл под вакуумом водоструйного насоса, как описано выше для растений. Измеряют точно объем сконцентрированной пробы, отбирают 0,2 мл и далее поступают, как описано при анализе овощей и фруктов.
2.5.2. Получение метилпроизводных эфаля (этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты)
Подготовленные аликвоты экстрактов (V ) метилируют
2
диазометаном. Одновременно метилируют стандартные растворы
этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты. Для этого берут по 0,1
мл рабочих стандартных растворов (10 мкг/мл, 5 мкг/мл, 2 мкг/мл) и
по 0,9 мл смеси растворителей метилгликоль - ацетонитрил (1:1),
т.е. подготовленные к метилированию и дальнейшему
газохроматографическому анализу стандарты содержат 1 мкг/мл, 0,5
мкг/мл, 0,2 мкг/мл этилфосфита алюминия или фосфористой кислоты.
2.5.2.1. Получение диазометана
Вследствие токсичности и раздражающего действия диазометана прибор должен быть установлен в вытяжном шкафу. При работе использовать индивидуальные средства защиты: экран, перчатки, очки.
Вариант I <1>, <2>. В реакционную колбу (см. рис. 1) помещают 6 г кали едкого, 3 мл метанола и 3 мл гидразингидрата. Через смесь продувают азот с расходом 100 мл/мин. Из капельницы подают хлороформ со скоростью 1 капля за 1 - 2 с.
Вариант II <3>. В реакционную колбу (см. рис. 1) вводится 10 г паратолилсульфометилнитрозамида, 25 мл 4% KOH в метаноле и 100 мл этилового эфира. Через смесь продувают азот с расходом 100 мл/мин.
2.5.2.2. В подготовленные к метилированию пробы и стандарты
вводят по 5 - 6 мкл ледяной уксусной, 3 - 5 мкл 20-процентной
серной кислоты и продувают получаемый в описанном выше приборе
диазометан до появления интенсивной желтой окраски раствора пробы
или стандарта. Затем медленно нейтрализуют избыток диазометана в
пробе (стандарте) прибавлением нескольких микролитров уксусной
кислоты до исчезновения окраски. Пробы и стандарты готовы к
газохроматографическому определению. Замеряют конечный объем
пробы, мл (V ). В хроматограф вводят 1 - 3 мкл полученного
3
раствора.
После окончания метилирования прекращают подачу в реакционную колбу хлороформа (вариант I), отключают азот, остатки в реакционной колбе заливают водой и тщательно промывают колбу и все части прибора водой.
2.5.3. Хроматографический анализ
Газовый хроматограф серии "Цвет" с пламенно-фотометрическим (фосфорным) детектором (ПФД) * или пламенно-ионизационным (ПИД) **.
Колонка хроматографическая стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 3,5 мм * (или 1 м **).
Неподвижная фаза - 15% карбовакс 20М на хроматроне N-AW-DMCS <*> (или SP-1000 на хромосорбе **).
Температура колонки 145 °C * (или 125 **).
Температура испарителя 180 °C * (или 250 **).
Газ-носитель - азот с расходом 50 мл/мин. * (или гелий 55 мл/мин. **).
Расход воздуха 120 мл/мин. <1> (400 мл/мин.).
Расход водорода 65 мл/мин. * (или 20 мл/мин. **).
Вводимый объем 1 - 3 мкл * (0,5 мкл **).
-9
Шкала множителя 2 x 64 x 10 .
Скорость диаграммной ленты 240 мм/час.
При условиях *:
Время удерживания:
Диметилфосфоната (метилирование фосфористой кислоты): 2,1 мин.
Метилэтилфосфоната (метилирование этилфосфита алюминия): 2,6 мин. (хроматограмма приведена на рис. 2 - не приводится).
Предел определения:
Диметилфосфоната - 0,1 нг
Метилэтилфосфоната - 0,1 нг
При условиях **:
Время удерживания диметилфосфоната 1,1 мин.
Предел определения диметилфосфоната 0,5 мкг.
Количественную оценку проводят методом соотношения со стандартами этилфосфита алюминия и фосфористой кислоты по высоте пиков.
Расчет результатов анализа проводят по формуле:
C x H x V x V
2 1 3
X = ----------------,
H x V x V x P
1 2 4
где:
X - содержание этилфосфита алюминия (фосфористой кислоты) в
анализируемой пробе, мг/кг, мг/л;
C - количество стандарта этилфосфита или фосфористой кислоты,
введенных в хроматограф, в нг;
H - высота пика стандартного раствора, мм;
1
H - высота пика пробы, мм;
2
V - конечный объем сконцентрированного экстракта пробы, мл;
1
V - объем пробы (мл), отобранной для метилирования из пробы
2
V ;
1
V - объем пробы после метилирования, мл;
3
V - объем пробы, введенной в хроматограф, мкл;
4
P - масса анализируемой пробы или объем анализированной пробы
воды, мл.
3. Техника безопасности
Соблюдать все необходимые требования при работе в химических лабораториях, а также правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений систем МЗ СССР N 2455-81 от 20.10.81.
Особое внимание обратить при работе с гидразингидратом и диазометаном. Соблюдать требования безопасности, описанные в методике.
Гидразингидрат - токсичная, пожароопасная жидкость (температура воспламенения 59 °C, самовоспламенения - 267 °C).
Остальные материалы раздела: Указы СССР 1917-1992
Предыдущая Методические указания по определению байфидана в зерновых и лекарственных культурах. в воде и почве методами газожидкостной и тонкослойнСледующая Методические указания по определению метаболитов фосфамида в биологических средах методом тонкослойной хроматографии утв. Минздравом СС