Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Геноцид собственного народа или зеленская чума 21 века 2024-04-27
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
Картинка недели
Указы СССР 1917-1992
Категории
Методические указания по определению остатков глина хлорсульфурона в зерне и соломе зерновых колосовых культур, в семенах и полове льна-д
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 755
Материал приурочен к дате: 1989-06-08
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1989-06-08 Материалы за: Год 1989
Автор: Мета Гость
Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5018-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТКОВ ГЛИНА (ХЛОРСУЛЬФУРОНА) В ЗЕРНЕ
И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР, В СЕМЕНАХ И ПОЛОВЕ
ЛЬНА-ДОЛГУНЦА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны В.А. Калининым, Т.С. Калининой (ТСХА).
Краткая характеристика препарата. Глин - N-(4-метил-6-метокси-1,3,5-
триазинил-2)-N'-[2-метоксикарбонил фенилсульфонил]мочевина. Общепринятое
название - хлорсульфурон. Брутто-формула C H ClN O S. Молекулярная масса
12 12 5 4
357,8. Химически чистый глин представляет твердое белое кристаллическое
вещество, т. пл. 174 - 178 °C. В виде сухой пленки на стеклянной пластинке
он устойчив к УФ-свету, через 1 мес. на ткани сухого растения разрушается
на 30%, сухой почве - на 15% и в водном растворе - на 50% под действием
искусственного солнечного света. В дистиллированной воде гидролизуется
медленно при pH от 5,7 до 7,0 и 20 °C, период полураспада - 4 - 8 недель.
В почве фитотоксичные остатки хлорсульфурона сохраняются до 2 лет, хотя
период его полураспада составляет 4 - 6 недель. В растительных тканях
препарат быстро распадается до нетоксичных метаболитов. Хорошо растворим
в метиленхлориде, этилацетате, ацетонитриле, ацетоне, растворимость в воде
зависит от pH и колеблется от 27,9 до 300 мг/л. Глин малотоксичен для
человека и теплокровных животных. Для крыс ЛД > 5500 мг/кг. Это
50
повсходовый гербицид, эффективный в борьбе с двудольными сорняками в
посевах зерновых культур и льна. Особо чувствительны к этому гербициду
сахарная и кормовая свекла, кукуруза, подсолнечник, картофель. Гербицид
разрешен для применения в посевах льна-долгунца в виде 75-процентной сухой
текучей суспензии при норме расхода 13 - 20 г/га.
Принцип метода. Метод основан на определении глина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, с использованием фотокондуктивного детектора и колонки с силикагелем, после экстракции органическим растворителем и очистки экстракта перераспределением действующего вещества в двух несмешивающихся растворителях. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 104.
Таблица 104
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ МЕТОДА
(n = 5, p = 0,95)
┌─────────────┬────────────┬─────────────┬────────┬────────────┬──────────┐
│Анализируемый│ Предел │ Диапазон │Среднее │Стандартное │Довери- │
│ объект │обнаружения,│определяемых │значение│отклонение, │тельный │
│ │ мг/кг │концентраций,│опреде- │ % │интервал, │
│ │ │ мг/кг │ления, %│ │% │
├─────────────┼────────────┼─────────────┼────────┼────────────┼──────────┤
│Зерно │0,01 │0,01 - 0,2 │83 │+/- 7,35 │+/- 9,31 │
│Солома │0,05 │0,05 - 0,2 │78 │+/- 6,81 │+/- 7,03 │
│Полова льна │0,05 │0,05 - 0,2 │81 │+/- 6,76 │+/- 7,52 │
│Семена льна │0,01 │0,01 - 0,2 │80 │+/- 8,23 │+/- 10,2 │
└─────────────┴────────────┴─────────────┴────────┴────────────┴──────────┘
Избирательность метода. В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при выращивании зерновых и льна-долгунца: 2,4-Д, 2М-4Х, байлетона, тилта, нурел-Д.
Реактивы, растворы. Хлорсульфурон с содержанием действующего вещества
99,9%. Ацетонитрил, высушенный над безводным Na SO и перегнанный.
2 4
н-Гексан. Хлороводородная кислота х.ч., 1 н водный раствор. Кислота
уксусная ледяная. Метиленхлорид перегнанный х.ч. Фосфат натрия безводный
ч.д.а. Хлорид натрия. Гидроксид натрия, 1 н водный раствор. Метиловый
спирт для хроматографии. Изопропиловый спирт х.ч. Хлороформ медицинский.
Циклогексан для хроматографии. Гелий. Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь 750 мл
циклогексана, 125 мл изопропанола, 125 мл метанола, 1 мл смеси 10 мл
ледяной уксусной кислоты с 1 мл дистиллированной воды. Раствор для
кондиционирования колонки для ВЭЖХ: 400 мл изопропанола + 100 мл ледяной
уксусной кислоты + 10 мл дистиллированной воды. Буферный раствор pH 10:
1,42 г безводного Na HPO и 40 г NaCl растворяют в 400 мл воды, доводят pH
2 4
до 10 путем добавления по каплям 1 н NaOH при непрерывном помешивании и
фиксируя pH с помощью иономера. Охлаждающая смесь: 33 г NaCl растворяют в
100 мл воды и добавляют лед до насыщения.
Приборы, аппаратура, посуда. Жидкостный хроматограф с фотокондуктивным детектором, например хроматограф "Waters", модель 510, с детектором Tracor, модель 965, и стальной колонкой длиной 30 см с сорбентом на основе силикагеля с удельной поверхностью 300 кв. м/г и размером частиц 10 мкм, силасорб-300 (ЧСФР, "Хемапол") или мю-порасил ("Waters"). Мельница лабораторная. Ротационный испаритель. Водоструйный насос. Иономер. Воронки: Бюхнера фарфоровые диаметром 70 мм; делительные на 150 мл. Концентраторы грушевидные (конические) на шлифах (N 19). Пипетки мерные на 0,2; 1,0; 5,0; 10 и 25 мл. Стаканы стеклянные на 100 и 600 мл. Колбы: мерные на 25; 50 и 100 мл; Бунзена на 800 мл.
Подготовка к определению. Хранение проб. Отобранные пробы подсушивают до стандартной влажности и хранят в сухом, хорошо вентилируемом помещении. Срок хранения до 6 мес. Перед анализом сухую пробу размалывают на лабораторной мельнице до размера частиц не менее 1 мм.
Кондиционирование хроматографической колонки. Перед началом работы хроматографа раствор для кондиционирования колонки и подвижную фазу дегазируют 2 ч, пропуская через растворы гелий. Операцию повторяют ежедневно в течение 1 ч перед началом анализа, не выключая прибора. При добавлении новой жидкой фазы дегазирование проводят в течение 2 ч. Готовую колонку устанавливают в термостат хроматографа и стабилизируют при 35 °C, пропуская через нее в течение 4 ч раствор для кондиционирования колонки со скоростью 0,5 мл и затем еще 4 ч подвижную фазу для ВЭЖХ с той же скоростью. Эту операцию проводят ежедневно перед началом ввода проб в ночное время с использованием таймеров (реле времени). Нарушение данного режима приводит к резкой потере чувствительности.
Приготовление стандартных растворов. Стандартный раствор N 1 с концентрацией хлорсульфурона 1 мг/мл готовят следующим образом: взвешивают 50 мг хлорсульфурона с точностью +/- 0,02 г, переносят навеску в мерную колбу на 50 мл метиленхлоридом и доводят объем раствора до метки этим же растворителем. Методом последовательного разбавления в метиленхлориде готовят стандартный раствор N 2 концентрацией 100 мкг/мл. Растворы N 1 и N 2 можно хранить в холодильнике не менее 1 мес. Ежедневно из раствора N 2 готовят стандартный раствор N 3 в метиленхлориде с концентрацией хлорсульфурона 1 мкг/мл. Для калибровки хроматографа ежедневно готовят рабочие стандартные растворы с концентрацией хлорсульфурона 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл, внося пипеткой соответствующее количество раствора N 3 в мерные колбы, упаривая метиленхлорид досуха током азота и доводя объем раствора до метки подвижной фазой. Хроматографируют по 20 мкл каждого рабочего раствора, измеряют высоту пика (или площадь) и строят график зависимости высоты пика от концентрации хлорсульфурона.
Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Навеску измельченного зерна (50 г) или соломы (10 г) помещают в стакан на 600 мл, заливают 150 мл этилацетата и гомогенизируют в течение 10 мин. при скорости 1000 об./мин. Экстракт декантируют в воронку Бюхнера с фильтром и фильтруют под вакуумом. Экстракцию повторяют дважды порциями по 150 мл этилацетата. Объединенный экстракт (общий объем 450 мл) упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 35 °C, обмывая колбу Бунзена этилацетатом. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 мл метиленхлорида, добавляют 25 мл буферного раствора (pH 10), и метиленхлорид полностью отгоняют на ротационном испарителе. Недопустимы капли метиленхлорида в водном растворе! Концентратор с водным буфером помещают в ледяную баню с температурой 10 °C на 20 мин. Охлажденный раствор быстро фильтруют в делительную воронку и промывают его тремя порциями хлороформа по 25 мл и двумя - циклогексана по 25 мл. Органические растворители отбрасывают. Водную фазу переносят в стакан и подкисляют 1 н хлороводородной кислотой до pH 2, фиксируя pH на иономере. Подкисленный раствор переносят в делительную воронку (чистую), обмывая стакан хлороформом, и экстрагируют хлорсульфурон из водной фазы тремя порциями по 25 мл хлороформа. Хлороформ упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 35 °C. Сухой остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы и хроматографируют.
Навеску измельченных семян льна-долгунца (50 г) помещают в стакан на 100 мл, заливают 150 мл ацетонитрила и гомогенизируют в течение 10 мин. Экстракт декантируют в воронку Бюхнера с фильтром и фильтруют под вакуумом. Повторяют экстракцию еще дважды по 150 мл ацетонитрила. Объединенный экстракт упаривают до объема 50 мл на ротационном испарителе при температуре 35 °C и переносят в делительную воронку, обмывая концентратор 10 мл ацетонитрила. Промывают экстракт 3 раза порциями по 50 мл н-гексана, гексан отбрасывают, а ацетонитриловый экстракт упаривают на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 мл метиленхлорида, добавляют 25 мл буферного раствора (pH 10) и метиленхлорид полностью отгоняют на ротационном испарителе. Концентратор с водным буфером помещают в ледяную баню с температурой минус 10 °C на 20 мин. Охлажденный раствор быстро фильтруют в делительную воронку и промывают его тремя порциями хлороформа по 25 мл и двумя циклогексана по 25 мл. Органическую фазу отбрасывают. Водную фракцию переносят в стакан, подкисляют 1 н хлороводородной кислотой до pH 2, фиксируя pH на иономере. Подкисленный раствор переносят в делительную воронку (чистую), обмывая стакан хлороформом, и экстрагируют хлорсульфурон из водной фазы хлороформом, тремя порциями по 25 мл. Из полученного раствора с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью удаляют растворитель. Сухой остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы и хроматографируют.
Условия хроматографирования. Жидкостный хроматограф "Waters", модель 510, с программатором температуры и фотокондуктивным детектором "Тракор", модель 365. Шкала аттенюатора 1 x 5 или 1 x 2. Скорость движения ленты самописца 300 мм/ч. Колонка стальная, длина 30 см, внутренний диаметр 3 мм. Неподвижная фаза - мю-порасил ("Waters"). Температура колонки 35 °C. Скорость потока подвижной фазы 0,5 мл/мин. Объем пробы, вводимой в колонку, 20 мкл. Абсолютное время удерживания хлорсульфурона 11 мин. Линейность детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг. Каждую анализируемую пробу вводят 2 раза и вычисляют среднюю высоту пика. Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор (1,0 мкг/мл), разбавляют.
Обработка результатов анализов. Содержание глина (X, мг/кг) рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
S AV
пр
X = -----,
S P
с
где:
S , S - высоты пиков соответственно стандарта и образца, мм;
с пр
A - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
P - масса анализируемого образца, г.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.
Остальные материалы раздела: Указы СССР 1917-1992
Предыдущая Методические указания по определению изофена и его метаболита диносеба в хлопковом масле методом тонкослойной хроматографии утв. МинздраСледующая Методические указания по определению глина хлорсульфурона в почве. воде и растительном материале методом иммуноферментного анализа утв.