Указы СССР 1917-1992

 

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4017-85

 

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДОЗАНЕКСА,

3-ХЛОР-4-МЕТОКСИАНИЛИНА, 3-ХЛОР-4-МЕТОКСИНИТРОБЕНЗОЛА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

 

       Cl

         \ ---

    CH O-//   \\-HCON(CH )                                     М.м. 228,68.

      3  \ ___ /        3 2

           ---

 

Дозанекс, синоним: метоксурон (действующее начало N'-(3-хлор-4-метоксифенил)-N,N-диметилмочевина) - белое кристаллическое вещество, температура плавления - 126 - 127 °С. Растворим в органических растворителях. Растворимость в воде - 678 мг/л.

Применяется в качестве гербицида на овощных и зерновых культурах.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1 мг/куб. м.

 

       Cl

         \ ---

    CH O-//   \\-NH                                            М.м. 157,6.

      3  \ ___ /   2

           ---

 

    3-хлор-4-метоксианилин  -  кристаллическое  вещество светло-коричневого

цвета,  температура  плавления  -  62  °С.  Хорошо растворим в органических

растворителях.   Практически   не  растворим  в  воде.  На  воздухе  быстро

                                       -3

окисляется.  Давление  пара - 3,38 х 10   мм рт. ст. при 20 °С. Летучесть -

29,9 мг/куб. м.

Применяется при производстве дозанекса, а также является его возможным продуктом разрушения.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны не установлена.

 

        Cl

         \ ---

    CH O-//   \\-NO                                            М.м. 187,6.

      3  \ ___ /   2

           ---

 

3-хлор-4-метоксинитробензол - кристаллическое вещество светлого цвета, температура плавления - 97 - 98 °С. Растворим в органических растворителях, практически не растворим в воде.

Применяется при производстве дозанекса.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны не установлена.

 

I. Характеристика метода

 

1. Определение основано на хроматографировании веществ в тонком слое силикагеля (пластинки "Силуфол") в подвижной фазе на основе ацетона с последующим обнаружением зон локализации по реакции азосочетания либо с помощью нингидринового реагента.

2. Отбор проб с концентрированием (фильтры АФА-ХП, АФА-ХА, этанол).

3. Метрологическая характеристика метода дана в таблице.

 

Таблица

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

 

┌───┬──────────────────────────────┬──────────────────────────────────────┐

│N │  Наименование характеристик  │               Вещества               │

│п/п│                              ├────────────┬────────────┬────────────┤

│   │                              │  дозанекс  │3-хлор-4-ме-│3-хлор-4-ме-│

│   │                              │            │токсианилин │токсинитро- │

│   │                              │            │            │бензол      │

├───┼──────────────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤

𗈕 │               2              │     3      │      4     │      5     │

├───┼──────────────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤

│1. │Диапазон определяемых         │0,5 - 10,0  │0,5 - 10,0  │0,5 - 10,0  │

│   │концентраций, мг/куб. м (пары,│            │            │            │

│   │аэрозоль)                     │            │            │            │

│2. │Предел обнаружения в воздухе  │0,5         │0,5         │0,5         │

│   │(при отборе 60 л воздуха),    │            │            │            │

│   │мг/куб. м                     │            │            │            │

│3. │Предел обнаружения в          │2           │2           │2           │

│   │анализируемом объеме, мкг     │            │            │            │

│4. │Среднее значение определения  │81,0        │83,1        │80,2        │

│   │стандартных количеств, %      │            │            │            │

│5. │Число параллельных определений│9           │9           │9           │

│6. │Стандартное отклонение, S, %  │5,9         │5,5         │5,8         │

│7. │Относительное стандартное     │0,07        │0,07        │0,07        │

│   │отклонение                    │            │            │            │

│8. │Доверительный интервал средне-│81,0 +/- 4,5│83,1 +/- 4,0│80,2 +/- 4,5│

│   │го при Р = 0,95 и n = 1, %    │            │            │            │

└───┴──────────────────────────────┴────────────┴────────────┴────────────┘

 

4. Определению не мешают вещества, используемые в синтезе дозанекса, другие замещенные анилина и нитробензола, а также гербициды, относящиеся к производным фенилмочевин. Анализируемые вещества (дозанекс, 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол) определению друг друга не мешают.

 

II. Реактивы, растворы, материалы

 

Дозанекс 98-процентный.

3-Хлор-4-метоксианилин 98-процентный.

3-Хлор-4-метоксинитробензол 98-процентный.

Спирт этиловый технический, ГОСТ 18300-72.

Гексан, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон, ГОСТ 2603-79.

Хлороформ, ГОСТ 215-74.

Кислота соляная, ч, ГОСТ 3118-77.

Олово двухлористое, ч, ГОСТ 36-78.

Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 4197-74.

Калий гидроксид, ГОСТ 6-01-301-74.

1-Нафтол, чда, ГОСТ 5838-79.

Нингидрин, чда, ТУ 6-09-2737-73.

Бутанол, ТУ 6006-78.

Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 18290-72.

Фильтры аэрозольные АФА-ХП-20 или АФА-ХА-20.

Пластинки для хроматографии "Силуфол", размер 150 х 150 мм.

 

Приготовление стандартных растворов

 

Стандартный раствор дозанекса с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески 0,051021 г в 50 мл этилового спирта. Раствор устойчив в течение недели.

Стандартный раствор смеси 3-хлор-4-метиланилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески каждого компонента 0,051021 г в колбе и 50 мл этилового спирта.

Рабочие стандартные растворы с содержанием дозанекса 10 - 120 мкг/мл и смеси 3-хлор-4-метиланилина с 3-хлор-4-метоксинитробензолом до 10 - 120 мкг/мл каждого компонента готовят для построения градуировочной шкалы на пластинках "Силуфол".

 

III. Приборы и посуда

 

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Поглотительные приборы Рыхтера (средняя модель), ТУ 25-11-1081-75.

Фильтродержатели.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Камеры хроматографические стеклянные, ГОСТ 10565-75.

Камеры для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.

Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.

Микропипетки емкостью 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.

Цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.

Пробирки градуированные с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Химические стаканы емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Баня со льдом (для отбора проб воздуха).

Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.

 

Приготовление подвижных фаз

 

Подвижная фаза N 1 (для хроматографирования дозанекса)смешивают хлороформ и ацетон в соотношении 18:3.

Подвижная фаза N 2 (для хроматографирования 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола): смешивают гексан и ацетон в соотношении 20:6.

Подвижные фазы готовят непосредственно в хроматографических камерах за 30 мин. до хроматографирования. Высота слоя растворителя не должна превышать 0,5 см.

 

Приготовление проявляющих реагентов

 

Проявляющий реагент N 1: к смеси 46 мл воды и 4 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют 1 г азотистокислого натрия. Раствор готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 2: к раствору 2,8 г гидроксида калия в 50 мл воды добавляют 0,1 г 1-нафтола. Реактив готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 3 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и прибавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты. Реактив устойчив в течение двух недель.

Проявляющий реагент N 4 (восстанавливающий): 10-процентный раствор двухлористого олова в концентрированной хлористоводородной кислоте. Раствор устойчив в течение месяца.

 

Подготовка шкалы стандартных пятен

 

Растворы для стандартных пятен дозанекса: в шесть градуированных пробирок с помощью микрошприца или микропипетки вносят 0; 0,03; 0,06; 0,120,24; 0,36 мл стандартного раствора дозанекса и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.

Растворы для стандартных пятен 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола: в шесть градуированных пробирок вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора смеси этих веществ и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.

На двух пластинках "Силуфол" на расстоянии 15 мм от края намечают на линию старта.

На линию старта пластинки N 1 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мл раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен дозанекса в виде отдельных пятен диаметром не более 10 - 12 мл. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг дозанекса.

На линию старта пластинки N 2 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мм раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен смеси 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола в виде пятен диаметром не более 10 - 12 мм. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг каждого из компонентов смеси.

 

IV. Условия отбора проб воздуха

 

Воздух со скоростью 1 - 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные аэрозольный фильтр, укрепленный в фильтродержателе, и поглотительный прибор Рыхтера, установленный в ледяную баню и заполненный 10 мл этилового спирта в качестве поглотительного раствора. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 60 л воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

 

V. Условия анализа

 

Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан и экстрагируют этиловым спиртом четырьмя порциями по 10 мл, выдерживая каждый раз по 3 - 4 мин. Экстракты сливают в грушевидную колбу. В эту же колбу сливают этиловый спирт из поглотительного прибора. Прибор обмывают дважды этиловым спиртом порциями по 3 - 5 мл, смывы также сливают в грушевидную колбу. Отгоняют растворитель на ротационном испарителе до объема 2,5 мл. Этот раствор переносят в градуированную пробирку и доводят объем этиловым спиртом точно до 3 мл.

По 0,2 мл полученного раствора наносят на середину линий старта пластинок N 1 и N 2, на которые предварительно были нанесены соответствующие стандартные пятна (см. раздел III). Диаметр пятен не более 10 - 12 мм.

Пластину N 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой N 1; пластину N 2 - в камеру с подвижной фазой N 2.

Хроматограммы развивают на высоту 10 см, вынимают из камер, подсушивают на воздухе в вытяжном шкафу.

Зоны локализации дозанекса на пластинке N 1 обнаруживают одним из двух способов:

а) нагревают пластину в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 3 - 5 мин., охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим реагентом N 1, а затем проявляющим реагентом N 2. Дозанекс обнаруживают в виде светло-коричневого пятна на сером фоне;

б) обрабатывают пластинку проявляющим реагентом 3, а затем нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 5 - 10 мин. Дозанекс обнаруживают в виде сиреневого пятна на светлом фоне.

    Значение R  дозанекса - 0,40. Окраска пятен устойчива.

              f

    Зоны         локализации         3-хлор-4-метоксинитробензола         и

3-хлор-4-метоксианилина  на  пластинке  N 2 обнаруживают следующим образом:

пластинку с помощью пульверизатора орошают проявляющим реагентом N 4, затем

нагревают  в  сушильном  шкафу  при  температуре  120 °С в течение 20 мин.,

охлаждают  до  комнатной температуры и орошают последовательно проявляющими

реагентами  N 1 и N 2. 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол

(восстановленный   до   соответствующего   амина)   обнаруживают   в   виде

красновато-коричневых  пятен с R  = 0,20  и  0,40  соответственно.  Окраска

                                f

пятен устойчива.

Для количественных расчетов из стандартных пятен на пластинах N 1 и N 2 выбирают пятна, близкие пятнам соответственно дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина, 3-хлор-4-метоксинитробензола по интенсивности окраски и размерам. Измеряют с помощью прозрачной миллиметровой бумаги или другим способом площади этих пятен и пятен пробы.

Концентрацию дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:

 

                                 G х S   х V

                                      пр    1

                            Х = -------------,

                                S   х V х V

                                 ст        20

 

    где:

    G - количество вещества в стандартном растворе, мкг;

    S   - площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм;

     пр

    S   - площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм;

     ст

    V  - общий объем пробы, мл;

     1

    V - объем хроматографируемой пробы, мл;

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям.

 

VI. Требования безопасности

 

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).

 

VII. Разработчики

 

Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений - ВНИТИГ, г. Уфа).