Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6205-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ САНМАЙТА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
O
CH \\
│ 3 --- Cl C H ClN OS.
H C-C---N/ \\ CH 19 25 2
3 │ \ ___ /\ --- │ 3
H C N --- \SCH --// \\-C-CH М.м. 364,9.
3 2 \ ___ / │ 3
--- CH
3
Санмайт - 4-хлор-2(1,1-диметилэтил-5/4-(1,1диметилэтил/фенил/метил/тио-3(2H)-пиридазин - белое кристаллическое вещество с температурой плавления 111 - 112 °C. Легко растворим в ацетоне, хлороформе; растворим в спирте, бензоле, нерастворим в воде. Устойчив при комнатной температуре. Разлагается при сильном УФ-облучении.
1. Характеристика метода
Определение основано на хроматографическом определении препарата (ГЖХ, ТСХ) после концентрирования из воздуха.
Отбор проб производится с концентрированием на бумажном фильтре "синяя лента".
Предел измерения в анализируемом объеме ГЖХ - 0,5 нг, ТСХ - 1 мкг.
Предел измерения в воздухе - 0,0025 мг/куб. м (ГЖХ), 0,05 мг/куб. м (ТСХ) при отборе 100 л воздуха.
Диапазон измеряемых концентраций - 0,0025 - 0,05 (ГЖХ), 0,05 - 0,5 мг/куб. м (ТСХ).
Определению не мешают наполнители технического препарата.
Граница суммарной погрешности измерения - +/- 19,5%.
2. Реактивы, растворы, материалы
Ацетон чда, ТУ 6-09-3313-86.
Гексан хч, ТУ 6-09-3375-78.
Натрия сульфат безводный чда, ГОСТ 4166-76.
Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкг/мл вещества.
Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкл/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.
К методу ГЖХ
Носитель для колонки - Хроматон N-AW с 5% SE-30.
Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74, в баллонах с редуктором.
К методу ТСХ
о-Толидин, МРТУ 6-09-6337-69.
Кислота уксусная ледяная хч, ГОСТ 18270-72.
Калия иодид хч, ГОСТ 4232-74.
Калий марганцовокислый хч, ГОСТ 20490-75.
Кислота соляная хч, ГОСТ 348-77.
Пластинки "Silufol"(Хемапол, ЧССР).
Подвижная фаза: ацетон - гексан (1:1).
Проявляющий реактив. Готовят раствор А: 0,2 г о-толидина растворяют в 2 мл уксусной кислоты. Раствор Б: 0,8 г иодида калия растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Растворы А и Б смешивают и доводят дистиллированной водой до 200 мл.
Раствор для хлорирования. На дно эксикатора помещают 2 - 3 г перманганата калия и добавляют 10 - 15 мл дистиллированной воды. Затем сюда же приливают 8 - 10 мл концентрированной соляной кислоты.
3. Приборы, аппаратура, посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
Фильтродержатели.
Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Водяная баня, ТУ 64-1-425-72.
Колбы конические, ГОСТ 25336-82, емкостью 100 мл.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 25 мл.
Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 0,1 мл и 1 мл.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 50 мл.
К методу ТСХ
Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
К методу ГЖХ
Хроматограф с детектором по захвату электронов (типа "Цвет", "Газохром"или др. марки).
Микрошприц, 10 мкл, МШ-10.
Колонка хроматографическая стеклянная, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм.
4. Отбор проб воздуха
Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента" в течение 20 мин. Длительность хранения проб в холодильнике - до 5 дней.
5. Проведение измерения
Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 15 мл гексана. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 1 часа. Экстракцию повторяют дважды. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5 - 7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителя. Отгоняют растворитель под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре не выше 30 °C. Далее высушивают досуха в токе воздуха. Сухой остаток смывают 1 мл гексана и хроматографируют.
6. Метод ГЖХ
Условия анализа
Твердый носитель Хроматон N-AW с 5% SE-30.
Длина колонки - 1 м.
Диаметр колонки - 3,5 мм.
Температура колонки - 220 °C.
Температура испарителя - 240 °C.
Температура детектора - 250 °C.
Газ-носитель - азот.
Скорость потока газа-носителя - 60 мл/мин.
Скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч.
Объем вводимой пробы - 4 мкл.
Время удерживания - 5 мин.
Линейный диапазон детектирования - 0,5 - 10 нг.
Для дополнительной идентификации проводится хроматографирование с термоионным детектором (жидкая фаза - 5% SE-30, колонка - 1 м, температура колонки - 210 °C, температура испарителя - 250 °C, скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч), время удерживания - 8 мин.
Количественное определение проводят методом расчета по соотношениям высота пика - концентрация. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 2 мкл стандартного раствора, измеряют высоту пиков и вычисляют среднее арифметическое из 5 определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (2 мкл) конечного экстракта получают большие пики или происходит "зашкаливание", что свидетельствует о наличии большого количества анализируемого вещества, готовят более разбавленные растворы, добавляя в конечный раствор пипеткой дополнительное замеренное количество растворителя.
Расчет концентрации
Концентрацию препарата (X) в мг/куб. м воздуха вычисляют по формуле:
C x h x V
ст пр общ
X = ----------------,
V x h x V
пр ст 20
где:
C - концентрация санмайта в стандартном растворе, введенном в
ст
хроматограф, нг;
h - высота пика пробы, мм;
пр
V - общий объем пробы, мл;
общ
V - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
пр
h - высота пика стандарта, мм;
ст
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
7. Метод ТСХ
Аликвотную часть раствора (0,2 мл) с помощью микропипетки наносят на
пластинку. Рядом с пробой наносят стандартные растворы с содержанием 1, 2,
3...10 мкг, после чего пластинку помещают в хроматографическую камеру.
После подъема фронта смеси растворителей ацетон - гексан (1:1) на 10 см
пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе ~ 2 мин. и помещают в
эксикатор с раствором для хлорирования. Пластинку вынимают из эксикатора,
выдерживают на воздухе 25 мин. до полного выветривания хлора и опрыскивают
проявляющим раствором. Препарат проявляется в виде темно-фиолетового пятна.
Нижний предел обнаружения - 1 мкг. Величина R = 0,58.
f
Расчет концентрации
Концентрацию санмайта (X) в воздухе в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G x V
X = --------,
V x V
1 20
где:
G - количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы,
мкг;
V - общий объем раствора, мл;
V - объем аликвоты, нанесенной на пластинку, мл;
1
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным
20
условиям, л.
8. Требования безопасности
Выполняются в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2455-81 от 20.10.81.