Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 мая 1983 г. N 2779-83
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ДАКОНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
Физико-химические свойства препарата
Даконил (хлортолонил, термил, экзотермил, фортурф, Браво-75, деконил 2787).
Cl CN
\____/
Cl_// \\_Cl
\____/
/----\
Cl CN
C Cl N М.м. 265,9.
8 4 2
2,4,5,6-Тетрахлоризофталонитрил - белое кристаллическое вещество без запаха, т. пл. 250 - 251 °С, т. кип. 350 °С при 760 мм рт. ст.
Давление паров 0,01 мм рт. ст. при 40 °С.
Растворимость в воде при 25 °С 0,6 мг/л, умеренно растворим в большинстве органических растворителей: ацетоне (2%), бутаноле, диметилсульфоксиде (2%), циклогексане (3%), диметилформамиде (3%), ксилоле (8%) и др.
Препарат термостабилен, устойчив к действию щелочей, водных растворов кислот, ультрафиолета.
Выпускается в виде 75-процентного с.п., 5 - 10-процентных гранул.
ЛД для крыс - 5000 мг/кг.
50
Используется для борьбы с болезнями картофеля и томатов, виноградной лозы, хмеля, перца, баклажан, для обработки хлопчатника и других культур.
I. Характеристика метода
1. Определение основано на хроматографировании анализируемого соединения на неподвижной фазе SE-30 или смеси ОУ-17 и QF-1 с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации (ДПР), а также в тонком слое силикагеля (окиси алюминия) с последующим применением для обнаружения зон локализации препарата проявляющего реагента.
2. Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента", фильтр аналитический АФА-ХА-20).
3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы: ГЖХ - 0,2 мг; ТСХ - 0,2 мкг.
4. Предел измерения в воздухе (при отборе 30 л воздуха): ГЖХ - 0,01 мкг/куб. м; ТСХ - 0,01 мг/куб. м.
5. Диапазон измеряемых концентраций: ГЖХ - 0,01 - 0,1 мкг/куб. м; ТСХ - 0,01 - 0,3 мг/куб. м.
6. Определению не мешают изомеры ГХЦГ, гексахлорбензол, 2,4'-4,4'-ДДТ, ДДД, ДДЭ.
7. Граница суммарной погрешности измерения: ГЖХ - 10,25%, ТСХ - 15,30%.
II. Реактивы, растворы, материалы
Даконил, 99,6%.
Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76.
Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
Фильтры аналитические АФА-ХА-20.
Стандартный раствор даконила в гексане (100 мкг/мл). Рабочий стандартный раствор для ГЖХ с содержанием 0,01 мкг/мл готовят путем разведения основного. Хранят в холодильнике не более 1 мес.
К методу ТСХ
Аммиак 25%-процентный водный, ГОСТ 3760-79.
Нитрат серебра, ГОСТ 1277-81.
Пластинки стандартные хроматографические "Силуфол" и "Алюфол"(ЧССР).
Проявляющий реагент: к раствору 0,5 г азотнокислого серебра в 5 мл дистиллированной воды прибавляют 7 - 10 мл 25-процентного водного раствора аммиака, смесь разбавляют ацетоном до 100 мл, хранят в темном месте.
К методу ГЖХ
Набивки для колонок:
SE-30 - 5% на хроматоне N-AW DMDS (0,16 - 0,20 мм);
1,5% ОУ-17 + 1,95% QF-1 на хроматоне N-AW HMDS (0,125 - 0,160 мм).
Азот газообразный особой чистоты.
III. Приборы и посуда
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронки химические диаметром 6 см, ГОСТ 8613-75.
Испаритель ротационный, МРТУ 42-2589-66.
Колбы конические емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы грушевидные, ГОСТ 10394-72.
Колбы мерные емкостью 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Концентраторы (рис. 1 - не приводится).
Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74.
Фильтродержатели.
Цилиндры мерные на 50 мл, ГОСТ 1770-74.
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
К методу ТСХ
Камера хроматографическая.
Пульверизаторы стеклянные.
К методу ГЖХ
Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации или детектором по захвату электронов (марки "Цвет" или др.).
Микрошприцы на 10 мкл.
Колонки стеклянные с внутренним диаметром 3 мм длиной 1 и 2 м.
VI. Условия отбора проб воздуха
Воздух со скоростью 1 л/мин. в течение 30 мин. аспирируют через двойной бумажный фильтр "синяя лента" или фильтр АФА-ХА-20, закрепленный в фильтродержателе. Пробы хранят в холодильнике не более суток.
V. Условия анализа
Измельченный бумажный фильтр помещают в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона, экстрагируют в течение 1 часа. Растворитель декантируют, экстракцию повторяют, экстракты объединяют.
Объединенный экстракт, содержащий пестицид, фильтруют в колбу для отгонки растворителя (рис. 1) через прокаленный сернокислый натрий, помещенный в воронку, содержащую подложку из обезжиренной ваты.
Ацетон отгоняют на ротационном испарителе под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл; оставшийся растворитель удаляют в токе азота особой чистоты досуха; полученный "сухой" остаток немедленно (!) растворяют в 0,5 мл гексана и анализируют методом ГЖХ и ТСХ.
В случае использования для отбора проб воздуха фильтров АФА-ХА-20 для экстракции используют н-гексан. Растворитель декантируют, экстракцию повторяют. Объединенный экстракт фильтруют через натрий сернокислый безводный в концентратор. Растворитель упаривают на ротационном испарителе при 40 °С, затем в токе азота особой чистоты до объема 0,5 мл и анализируют ГЖХ и ТСХ.
Определение методом ГЖХ
Газохроматографическое определение даконила производят с детектором постоянной скорости рекомбинации на хроматографе марки "Цвет" в условиях, приведенных в таблице 1.
Таблица 1
УСЛОВИЯ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДАКОНИЛА
┌───────────────────────────────┬─────────────┬──────────────┬────────┬──────────┬───────┬───────┐
│ Характеристика │Скорость азо-│ Температура │Скорость│Шкала │Объем │Абсол. │
│ хроматографической колонки │та (мл/мин.) │ (°С) │диаграм-│чувствит. │аликво-│время │
├───┬─────┬─────────┬────┬──────┼────┬────────┼────┬────┬────┤мной │электро- │ты, │удержи-│
│Ва-│Не- │ Тверд. │Дли-│Внутр.│че- │на про- │ко- │де- │ис- │ленты │метра (а) │взятой │вания │
│ри-│подв.│ носит. │на │диам. │рез │дувку │лон-│тек-│пар.│(мм/час)│ │для ГЖХ│(мин., │
│ант│фаза │ │(м) │ (мм) │кол.│детект. │ки │тора│ │ │ │(мкл) │сек.) │
├───┼─────┼─────────┼────┼──────┼────┼────────┼────┼────┼────┼────────┼──────────┼───────┼───────┤
│ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ -12│ │ │
│I │5% │Хроматон │1 │3 │60 │160 │190 │230 │230 │240 │20 х 10 │5 │1 мин. │
│ │SE-30│N-AW │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │46 сек.│
│ │ │DMCS │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ │(0,16 - │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ │0,20 мм) │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ -12│ │ │
│II │1,5% │Хроматон │2 │3 │40 │160 │195 │230 │230 │240 │20 х 10 │5 │6 мин. │
│ │ОУ-17│N-AW │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │15 сек.│
│ │+ │HMDS │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │1,95%│(0,125 - │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │QF-1 │0,160 мм)│ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │
└───┴─────┴─────────┴────┴──────┴────┴────────┴────┴────┴────┴────────┴──────────┴───────┴───────┘
Расчет концентрации препарата (мг/куб. м) в воздухе производят по формуле:
а х V х Н
х
Х = -----------,
Н х v х V
20
где:
а - количество стандартного препарата, введенное в хроматограф, мкг;
Н - высота пика стандартного раствора, мм;
Н - высота пика препарата в исследуемой пробе, мм;
х
v - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;
V - конечный объем анализируемого экстракта, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным
20
условиям.
Определение методом ТСХ
Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно (микропипеткой или микрошприцом) наносят на хроматографическую пластинку ("Силуфол" или "Алюфол"). Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы даконила (0,1, 1 и 5 мкг препарата).
Развитие хроматограмм производят в смеси гексана с ацетоном в объемном соотношении 4:1. После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку проветривают на воздухе до полного испарения растворителя.
Подготовленные таким образом хроматографические пластинки обрабатывают
при помощи пульверизатора проявляющим реагентом и помещают на 7 - 10 мин. в
ультрафиолет. Зоны локализации препарата проявляются в виде серо-черных
пятен на белом фоне. Величина R даконила на пластинках "Силуфол"или
f
"Алюфол" соответственно равна 0,45 и 0,49.
Количественное определение даконила в пробе производят путем сравнения интенсивности окраски к площади пятна пробы и стандартных растворов.
Концентрацию препарата (Х) в воздухе в мг/куб. м вычисляют по формуле:
а х V
Х = -------,
v х V
20
где:
а - количество препарата, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;
V - общий объем пробы, мл;
v - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным
20
условиям, л.
VI. Требования безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.
VII. Разработчики
ВНИИГИНТОКС, г. Киев.