Указы СССР 1917-1992

 

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

27 апреля 1984 г. N 3022-84

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО СИСТЕМАТИЧЕСКОМУ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ АНАЛИЗУ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ ГЕРБИЦИДОВ РАЗЛИЧНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ

ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ПРОБАХ ВОДЫ, ПОЧВЫ И РАСТЕНИЯХ

 

1. Характеристика анализируемых гербицидов

 

2,4-Дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-Д)

Структурная формула (не приводится).

 

    C H O Cl                                     Мол. м. 221,04.

     8 6 8  2

 

Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 141 °C. Ткип. = 160 °C при 0,4 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,5 г/л. Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей.

Применяется для борьбы с двудольными сорняками на посевах зерновых культур.

    Препарат среднетоксичен. ЛД   = 875 мг/кг.

                               50

МДУ в пищевых продуктах не допускается, в кормах для молочного скота и птицы - 0,1 мг/кг, для откормочных животных и птицы - 0,6 мг/кг. ПДК в воде - 0,2 мг/л.

 

2-Метокси-3,6-дихлорбензойная кислота (дикамба, банвел Д)

Структурная формула (не приводится).

 

    C H O Cl                                     Мол. м. 221,04.

     8 6 8  2

 

    Белое  кристаллическое  вещество.  Тпл. = 114 - 116 °C. Растворимость в

воде   -   1,5   г/л.   Хорошо   растворяется  в  большинстве  органических

растворителей.

    Препарат малотоксичен. ЛД   = 1100 мг/кг.

                             50

    ПДК в почве - 0,25 мг/кг.

 

    3-Метоксикарбамидофенил-N-(3'-метилфенил)-карбамат            (бетанал,

фенмедифам)

    Структурная формула (не приводится).

 

    C  H  O N                                    Мол. м. 300,32.

     16 16 4 2

 

Порошок белого цвета. Тпл. = 143 - 144 °C. Плохо растворяется в воде - менее 0,01 г/л. Хорошо растворяется в этиловом спирте, ацетоне, циклогексаноне.

Используется для борьбы с сорной растительностью при повсходовом применении на посевах сахарной и столовой свеклы.

    Малотоксичен. ЛД   = 5000 - 8000 мг/кг.

                    50

    МДУ в свекле - 0,2 мг/кг. ПДК в воде - 0,5 мг/л.

 

    N-(3,4-Дихлорфенил)-N'-метокси-N'-метилмочевина (линурон)

    Структурная формула (не приводится).

 

    C H  O N Cl                                  Мол. м. 249,10.

     9 10 2 2  2

 

    Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 93 - 95 °C. Растворимость в воде

- 75 мг/л. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.

    Применяется в виде смачивающегося порошка с содержанием д.в. - 80%.

    Малотоксичен. ЛД   = 1500 мг/кг.

                    50

МДУ в картофеле, бобовых, кукурузе - 0,1 мг/кг, моркови - 0,05 мг/кг. ПДК в воде водоемов санитарно-бытового водопользования - 1,0 мг/л, для условий сельского хозяйства - 0,02 мг/л. ПДК в почве - 1,0 мг/кг.

 

S-Этил-N,N-дипропилтиокарбамат (эптам)

 

                C H

               / 3 7

    C H -S-C -N

     2 3   ││  \

           O    C H

                 3 7

 

    C H  OSN                                     Мол. м. 189,82.

     9 19

 

Бесцветная или слегка желтоватая жидкость. Уд. масса - 0,966. Плохо растворим в воде - 0,4 г/л. Смешивается с большинством органических растворителей. Ткип. = 120 °C при 10 мм рт. ст. Давление пара - 0,15 мм рт. ст. при 25 °C.

Применяется для борьбы с сорняками на посевах различных сельскохозяйственных культур.

    Малотоксичен. ЛД   = 1600 - 3000 мг/кг.

                    50

    МДУ в свекле - 0,05 мг/кг. ПДК в воде - 0,1 мг/л.

 

    S-Пропил-N-этил-N-бутилтиокарбамат (тиллам)

 

                C H

               / 2 3

    C H -S-C -N

     3 7   ││  \

           O    C H

                 4 9

 

    C  H  OSN                                    Мол. м. 205,35.

     10 22

 

Жидкость желтого цвета с золотистым оттенком. Уд. вес = 0,956. Ткип. = 142,5 °C при 20 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,06 г/л. Смешивается со многими органическими растворителями. Давление пара - 0,085 мм рт. ст. при 25 °C.

Используется для борьбы с сорной растительностью на посевах табака, сахарной свеклы, конопли, томатов.

    Малотоксичен. ЛД   = 1120 мг/кг.

                    50

    МДУ  в  овощах, томатах, сахарной и столовой свекле - 0,05 мг/кг. ОДК в

почве - 0,6 мг/кг. ПДК в воде - 0,01 мг/л.

 

    S,N-Диэтил-N-циклогексилтиокарбамат (ронит)

 

             O

      --     ││

    /    \-N-C -S-C H

    \    / │       2 5

      --   C H

            2 5

 

    C  H  OSN                                    Мол. м. 215,36.

     11 21

 

Слегка желтоватая жидкость. Уд. масса = 0,970. Ткип. = 145 - 146 °C при 10 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,1 г/л. Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей. Давление пара - 0,002 мм рт. ст. при 25 °C.

Гербицид, применяющийся на посевах сахарной свеклы, шпината.

    Малотоксичен. ЛД   = 3600 мг/кг.

                    50

    МДУ в сахарной свекле и столовой свекле - 0,3 мг/кг.

 

    2-Хлор-4,6-диэтиламино-симм-триазин (симазин)

 

               Cl

               │

            N// \N

            │   ││

           / \\ /\

    C H -NH    N  NH-C H

     2 5              2 5

 

    C H  N Cl                                    Мол. м. 201,66.

     7 12 5

 

    Белое  кристаллическое вещество. Тпл. = 225 - 227 °C. Плохо растворим в

воде и органических растворителях.

    Применяется препаративная форма с содержанием д.в. 50%.

    Малотоксичен. ЛД   = 5000 мг/кг.

                    50

    МДУ  в  фруктах  -  0,2  мг/кг,  винограде - 0,05 мг/кг, зерновых - 1,0

мг/кг. ПДК в воде - отсутствие.

 

    2-Хлор-4-этиламино-6-изопропиламино-симм-триазин (атразин)

 

               Cl

               │

            N// \N

            │   ││      CH

           / \\ /\     /  3

    C H -NH    N  NH-CH

     2 5               \

                        CH

                          3

 

    C H  N Cl                                    Мол. м. 215,69.

     8 14 5

 

    Бесцветный  кристаллический  порошок.  Тпл.  =  173  -  175  °C.  Плохо

растворим в воде.

    Гербицид. Выпускается в виде смачивающегося порошка (50% д.в.).

    Малотоксичен. ЛД   = 3080 мг/кг.

                    50

    МДУ в зерновых, фруктах, овощах - 0,1 мг/кг. ПДК в воде - 0,5 мг/л.

 

    2-Метилтио-4,6-диизопропиламино-симм-триазин (прометрин)

 

                 SCH

                 │  3

              N// \N

    CH        │   ││      CH

      3\     / \\ /\     /  3

        CH-NH    N  NH-CH

       /                 \

    CH                    CH

      3                     3

 

    C  H  N S                                    Мол. м. 241,36.

     10 19 5

 

    Белое  кристаллическое  вещество.  Тпл. = 118 - 120 °C. Растворимость в

воде - 0,05 г/л. Хорошо растворим в органических растворителях.

    Гербицид, применяющийся на посевах гороха и др. культур.

    Малотоксичен. ЛД   = 3150 - 3750 мг/кг.

                    50

    МДУ  в  овощах  и картофеле - 0,1 мг/кг. ПДК в почве - 0,5 мг/кг. ПДК в

воде - 3,0 мг/л.

 

    2,6-Динитро-4-трифторметил-N,N-дипропиланилин (трефлан, нитран)

    Структурная формула (не приводится).

 

    C H  N O F            Мол. м. 335,38.

     9 16 3 4 3

 

    Желто-оранжевые  кристаллы.  Тпл. = 48,5 - 49 °C. Ткип. = 139 - 140 °C.

Растворимость   в   воде  менее  1  мг/л.  Хорошо  растворяется  во  многих

                                                     -4

органических растворителях. Давление пара - 1,99 x 10   мм рт. ст. (29 °C).

    Применяется  как  гербицид для довсходового внесения на посевах табака,

гороха и др.

    Малотоксичен. ЛД   = 10 г/кг.

                    50

    МДУ в луке, моркови, капусте - 0,5 мг/кг. ПДК в воде - 1,0 мг/л.

 

    1-Фенил-4-амино-5-хлор-пиридазон-6 (пирамин, феназон)

    Структурная формула (не приводится).

 

    C  H N OCl            Мол. м. 221,65.

     10 8 3

 

    Белый  кристаллический  порошок.  Тпл.  = 205 - 206 °C. Растворимость в

воде - 0,004 г/л. Хорошо растворим в ацетоне, метаноле.

    Выпускается в виде 80% смачивающегося порошка.

    Малотоксичен. ЛД   = 3500 мг/кг.

                    50

ОДК в почве - 0,7 мг/кг. ПДК в воде - 2,0 мг/л.

 

2. Основные положения

 

2.1. Принцип метода

 

Методика основана на газохроматическом определении гербицидов или их модифицированных производных с помощью детекторов постоянной скорости рекомбинации и термоионного после выделения их образцов ацетоном и очистки экстракта перераспределением в системах двух несмешивающихся жидкостей. При очистке производится одновременное разделение препаратов на группы, в которых отсутствуют соединения, имеющие близкие хроматографические характеристики. Для гербицидов, способных перегоняться с водяным паром, предусмотрен метод очистки этим способом от сопутствующих примесей. Уровень допустимых остаточных количеств достигается способами химического модифицирования: метилирования свободных карбоновых кислот и бромирования ароматических аминов, выделяющихся в результате щелочного гидролиза фениламидов.

 

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ МЕТОДИКИ И СТАТИСТИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

 

┌───────────┬────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│Препараты │       Предел обнаружения,      │ % определения стандартных  │

│           │       мг/кг, мг/л, мл/кг       │    количеств при n = 5     │

│           ├─────────┬─────────┬────────────┤                            │

│           │  почва  │  вода   │  растения  │                            │

├───────────┼─────────┼─────────┼────────────┼────────────────────────────┤

│2,4-Д      │0,01     │0,01     │0,04        │79,0 +/- 3,4                │

│Дикамба    │0,01     │0,01     │0,04        │85,8 +/- 2,6                │

│Бетанал    │0,005    │0,005    │0,02        │65,2 +/- 4,7                │

│Линурон    │0,005    │0,005    │0,02        │69,4 +/- 6,2                │

│Эптам      │0,05     │0,05     │0,2         │97,4 +/- 5,9                │

│Тиллам     │0,05     │0,05     │0,2         │88,0 +/- 3,5                │

│Ронит      │0,05     │0,05     │0,2         │91,4 +/- 6,4                │

│Атразин    │0,05     │0,05     │0,2         │94,0 +/- 3,3                │

│Прометрин  │0,05     │0,05     │0,2         │92,1 +/- 2,1                │

│Симазин    │0,05     │0,05     │0,2         │71,9 +/- 4,0                │

│Трефлан    │0,01     │0,01     │0,04        │82,6 +/- 6,7                │

│Пирамин    │0,005    │0,005    │0,02        │80,8 +/- 7,9                │

└───────────┴─────────┴─────────┴────────────┴────────────────────────────┘

 

2.2. Реактивы и материалы

 

Стандартные растворы гербицидов в ацетоне (10 - 100 мкг/мл).

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон чда, ГОСТ 2603-79.

Этилацетат чда, ГОСТ 22300-76.

Натрия гидроокись хч, ГОСТ 4828-77.

Раствор натрия гидроокиси 1 н и 10 н водный.

Кислота соляная хч, ТУ 62-09-2437-72.

Раствор соляной кислоты 1 н водный.

Натрий сернокислый безводный хч, ГОСТ 6058-77.

Реактивы для метилирования:

Гидразид-гидрат чда.

Метанол хч, ГОСТ 6995-77.

Калия гидроокись ч, ГОСТ 9285-78.

Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.

Эфир диэтиловый хч, ГОСТ 6262-79.

Реактивы для щелочного гидролиза:

Этиленгликоль ч, ГОСТ 10164-75.

Этиловый спирт - ректификат, ТУ 6-09-1710-72.

Калия гидроокись ч, ГОСТ 9285-78.

Реактивы для бромирования:

Кислота серная хч, ГОСТ 4204-77.

Калия бромид хч, ГОСТ 4160-74.

Калия бромат хч, ГОСТ 4457-74.

2,4,6-Траметиланилин (мезидин) ч, фирма "Fluka AG", Швейцария.

Натрий сернокислый безводный ч, ТУ 6-09-4059-75.

Толуол чда, ГОСТ 5789-78.

Раствор серной кислоты, 1 н водный.

Раствор бромида калия 20% в 1 н растворе серной кислоты.

Раствор бромата калия 1% водный, хранить в темной посуде на холоде.

Раствор мезидина 0,2% в 1 н растворе серной кислоты, хранить в темной посуде на холоде.

Газы и неподвижные фазы для хроматографии:

Азот особой чистоты или аргон высшего сорта.

Водород.

Воздух сжатый.

5% силиконовой фазы SE-30, нанесенной на Хроматон N-AW DMCS (0,16 - 0,20 мм).

5% силиконовой фазы XE-60, нанесенной на Хроматон N-AW DMCS (0,16 - 0,20 мм).

 

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

 

Газовый хроматограф "Цвет-106"или аналогичный, оснащенный детекторами термоионным и постоянной скорости рекомбинации (электронозахватным) и настроенный на работу двух детекторов одновременно. В линию термоионного детектора подключается стеклянная колонка (1 м x 3 мм), содержащая 5% SE-30, а в линию детектора постоянной скорости рекомбинации - стеклянная колонка (2 м x 3 мм) с 5% XE-60.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный.

Прибор для получения диазометана (рис. 2 - не приводится).

Масляная баня с регулятором температуры от 150 до 200 °C.

В Методике используется стандартная химическая посуда, выпускаемая отечественной промышленностью.

 

2.4. Подготовка к определению

 

Стандартные растворы гербицидов приготавливаются обычным способом и могут храниться на холоде в темных склянках в течение 1 месяца. Годность стандартных растворов к применению проверяется хроматографическим путем сравнения с хроматограммами полученных ранее свежеприготовленных растворов. Для каждого стандартного раствора определяется калибровочный коэффициент, который используется и для количественных расчетов (см. раздел 2.7).

Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия безводный прокалить.

Хроматографические колонки и детекторы кондиционируются перед началом работы не менее 1 часа.

Получение диазометанав реакционную колбу прибора (рис. 2) помещают 6 г калия гидроокиси, 3 мл метанола и 3 мл гидразин-гидрата. В приемную колбу наливают 30 мл диэтилового эфира. Из капельницы подается хлороформ со скоростью 1 капля за 1 - 2 сек. Окончание реакции получения диазометана определяется по выделению белых паров в реакционной колбе или по появлению бурой окраски реакционной смеси. Эфирный раствор диазометана интенсивного желтого цвета предпочтительно применять свежеполученным, но можно хранить 3 - 5 дней в темной склянке на холоде.

Приготовление щелочного этиленгликоля: 1 г калия гидроокиси растворяется в 1 мл смеси этанол - вода (1:1) и объем доводится до 25 мл этиленгликолем.

Проверка раствора мезидина на чистоту: мезидин очищается от примесей, мешающих определению, хроматографированием на колонке (10 см x 0,5 мм), содержащей 5 см основной окиси алюминия. Мезидин в количестве 10 мл пропускают через колонку и отбирают первые 5 мл элюата.

К 10 мл 0,2% раствора мезидина в 1 н водном растворе серной кислоты прибавляются 1 мл 20% раствора бромида калия и 1 мл 1% раствора бромата калия. Смесь помещается на 15 мин. в темное место. Избыток брома после бромирования удаляется небольшими порциями сульфата натрия, реакционная смесь подщелачивается 15 мл 10 н раствора едкого натра и экстрагируется 5 мл толуола. При хроматографировании 5 мкг толуольного слоя не должно быть пиков, имеющих близкие параметры удерживания с бромпроизводными анилина, триметиланилина и 3,4-дихлоранилина.

Условия хроматографического разделения гербицидов

Расход газа-носителя через колонку в линии ДПР - 60 мл/мин., а в линии ТИД - 30 мл/мин. На поддувку ДПР расход газа составляет 160 мл/мин. Расход водорода для ТИД - 15 мл/мин., воздуха - 300 мл/мин.

Для хроматографического разделения гербицидов необходимы два температурных режима:

а) температура испарителя - 230 °C, термостата колонок - 190 °C, термостата детекторов - 230 °C.

В этих условиях времена удерживания гербицидов (или их производных) составляют при анализе с помощью ТИД: атразин - 3,1 мин., симазин - 3,1 мин., прометрин - 5,4 мин.; при анализе с помощью ДПР: метиловый эфир 2,4-Д - 4,1 мин., метиловый эфир дикамбы - 2,1 мин., 2,4,6-трибром-3-метиланилин (бетанал) - 4,0 мин., 2,6-дибром-3,4-дихлоранилин (линурон) - 4,0 мин., 2,4,6-трибром-анилин (пирамин) - 3,0 мин., трефлан - 3,7 мин.;

б) температура испарения - 190 °C, термостата колонок - 140 °C.

Этот режим используется при анализе тиокарбаматов с помощью ТИД. Времена удерживания гербицидов: эптам - 3,2 мин., тиллам - 5,2 мин., ронит - 11,4 мин.

 

2.5. Отбор проб

 

Отбор проб для анализа производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79.

Для анализа отбирают навески средних проб в количествах: 100 мл воды, 100 г почвы известной влажности и 25 г свежесобранной зеленой массы.

 

2.6. Проведение определения

 

На рис. 1 приведена блок-схема хода аналитического определения микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии в пробе.

 

┌──────────┐   ┌──────────┐   ┌──────────┐   ┌────────┐

│Кипячение │──>│Ацетоновый│──>│Щелочно- │<──┤1 н NaOH│

│с ацетоном│   │ экстракт │   │ацетоновый│   └────────┘

└──────────┘   └──────────┘   │ раствор  │

                              └───┬──────┘

              Перераспределение   │

                с н-гексаном ---->│

                                  │

         ┌───────────────┐        │     ┌───────────────────────┐

         │Гексановый слой│<───────┴────>│Щелочно-ацетоновый слой│

         └─────────┬─────┘              └────────────────┬──────┘

 Перераспределение │             Перераспределение       │

    с 1 н HCl ---->│              с этилацетатом ------->│

                  /                                      │

┌──────────┐     / ┌──────────┐         ┌─────────────┐  \/  ┌──────────┐

│Гексановый│    \/ │Солянокис-│         │Этилацетатный│<---->│Щелочно-  │

│   слой   │<----->│лый слой  │         │    слой     │      │ацетоновый│

└────┬─────┘       └────┬─────┘         └──────┬──────┘      │слой      │

     \/                 \/                     \/            └────┬─────┘

┌──────────┐    ┌─────────────┐         ┌─────────────┐           \/

│Концентри-│    │Доводка pH до│         │Концентриро- │      ┌────────────┐

│рование   │    │10 - 12 с 1 н│         │вание        │      │ Доводка pH │

└────┬─────┘    │    NaOH     │         └──────┬──────┘      │до 1 с конц.│

     │          └───────┬─────┘                \/            │    HCl     │

     \/                 │                ┌────────────┐      └─┬──────────┘

┌────────────┐          │<-Перерас-      │    ТИД     │        │<──┐

│Дистилляция │          │  пределение    │ (симазин)  │        │Перерас-

│с водяным  │          │  с гексаном    └─────┬──────┘        │пределение

│   паром,   │          \/                     \/              │с этилацетатом

│экстракция │    ┌──────────┐           ┌────────────┐        │

│  гексаном  │    │Гексановый│           │  Гидролиз  │        │

└────┬───────┘    │   слой   │           └─────┬──────┘        \/

     \/           └─────┬────┘                 \/        ┌────────────────┐

┌──────────┐            \/               ┌────────────┐  │ Этилацетатный  │

│Гексановый│      ┌──────────┐           │Бромирование│  │      слой      │

│экстракт │      │Концентри-│           └─────┬──────┘  └───────┬────────┘

└────┬─────┘      │рование   │                 \/                \/

     \/           └─────┬────┘           ┌────────────┐  ┌────────────────┐

┌──────────┐            \/               │    ДПР     │  │Концентрирование│

│Концентри-│      ┌──────────┐           │ (бетанал,  │  └───────┬────────┘

│рование   │      │   ТИД    │           │  пирамин)  │          \/

└────┬─────┘      │(атразин, │           └────────────┘  ┌────────────────┐

     \/           │прометрин)│                           │ Метилирование  │

┌──────────┐      └──────────┘                           └───────┬────────┘

│   ТИД    │                                                     \/

│ (эптам,  │                                             ┌────────────────┐

│тиллам,  │                                             │      ДПР       │

│  ронит)  │                                             │(2,4-Д,дикамба) │

└─────┬────┘                                             └────────────────┘

      \/

┌──────────┐

│   ДПР    │

│(трефлан) │

└─────┬────┘

      \/

┌──────────┐

│Гидролиз │

└─────┬────┘

      \/

┌──────────┐

│Бромирова-│

│ние       │

└─────┬────┘

      \/

┌──────────┐

│   ДПР    │

│(линурон) │

└──────────┘

 

Рис. 1. Блок-схема хода аналитического определения

микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии

в одной пробе

 

2.6.1. Подготовка проб воды к определению

К 100 мл воды, отобранной для анализа, прибавляют 5 мл 10 н раствора едкого натра.

2.6.2. Выделение гербицидов из почвы и растений

Пробы почвы или растений заливают таким количеством ацетона, чтобы они были полностью покрыты растворителем, и помещают на водяную баню с температурой 70 - 75 °C. Колбы присоединяют к обратным холодильникам и выдерживают в этих условиях в течение 1 часа. После этого содержание колб охлаждается. Собирают отфильтрованный ацетоновый экстракт и упаривают его с помощью ротационного испарителя до объема 50 мл. К полученному остатку прибавляют 50 мл 1 н раствора едкого натра.

2.6.3. Очистка экстрактов и разделение гербицидов

Дальнейшее определение для проб воды, почвы и растительных проб проводится одинаково.

2.6.3.1. Отделение тиокарбаматов, трефлана, атразина, прометрина и линурона от прочих гербицидов

Щелочно-ацетоновый раствор экстрагируется в делительной воронке трижды по 30 мл н-гексана. Все порции гексана объединяют.

2.6.3.2. Отделение тиокарбаматов, трефлана и линурона от атразина и прометрина

Гексановый экстракт по пункту 2.6.3.1 экстрагируют тремя порциями по 25 мл 1 н раствора соляной кислоты. Солянокислые растворы объединяют.

2.6.3.3. Отделение бетанала, пирамина и симазина от 2,4-Д и дикамбы

К щелочно-ацетоновому экстракту после п. 2.6.3.1 прибавляют 100 мл 1 н раствора едкого натра и препараты экстрагируют трижды по 50 мл этилацетата. Фракции этилацетата объединяют.

2.6.3.4. Выделение 2,4-Д и дикамбы в виде свободных кислот

Щелочно-ацетоновый раствор после 2.6.3.3 подкисляют концентрированной соляной кислотой до pH = 1 и экстрагируют в делительной воронке тремя порциями по 50 мл этилацетата. Этилацетатные экстракты объединяют.

2.6.3.5. Выделение атразина и прометрина

Солянокислый экстракт после п. 2.6.3.2 подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 10 мл) и экстрагируют в делительной воронке трижды по 25 мл гексана. Гексановые экстракты объединяют.

2.6.3.6. Выделение тиокарбаматов, трефлана и линурона

Отделение тиокарбаматов, трефлана и линурона производится от коэкстрактивных веществ перегонкой с водяным паром.

Гексановый экстракт после п. 2.6.3.2 упаривается на ротационном испарителе до объема 10 мл и переносится количественно на слой воды в дистилляционной колбе. Проба кипятится на электроплитке в течение 1 часа. Собранный водный дистиллят экстрагируется трижды по 25 мл гексана.

2.6.4. Концентрирование

Органические экстракты, полученные по п. п. 2.6.3.3 - 2.6.3.6, осушаются безводным сульфатом натрия и упариваются с помощью ротационного испарителя.

2.6.5. Детектирование гербицидов без модифицирования молекул

2.6.5.1. Определение тиокарбаматов и трефлана

К упаренному экстракту после п. 2.6.3.6 прибавляют 1 мл этанола и хроматографируют аликвоту полученного раствора с помощью ДПР и ТИД в условиях, приведенных выше.

2.6.5.2. Определение симазина, атразина и прометрина

К упаренным по п. п. 2.6.3.3 - 2.6.3.5 экстрактам прибавляют по 1 мл ацетона и хроматографируют аликвоту полученного раствора с помощью ТИД в условиях, приведенных выше.

Однако, учитывая, что около 5% атразина после перераспределения в системе гексан - ацетон - 1 н раствор едкого натра остается в водно-ацетоновой фазе, в случаях больших концентраций атразина он может быть в дальнейшем идентифицирован ошибочно как симазин. Это вызвано тем, что на колонке с 5% SE-30 симазин и атразин практически не разделяются. Для решения задачи идентификации следует воспользоваться альтернативной колонкой, содержащей 5% XE-60. В тех же температурных режимах, что и для колонки с SE-30, симазин и атразин имеют разные параметры удерживания.

2.6.6. Модифицирование молекул гербицидов

2.6.6.1. Получение метиловых эфиров 2,4-Д и дикамбы

Упаривают этилацетатный экстракт (2.6.3.4) и к сухому остатку прибавляют 3 - 5 мл эфирного раствора диазометана. Через 10 - 15 мин. диазометан удаляют током воздуха и вводят аликвоту в хроматограф.

2.6.6.2. Определение бетанала, пирамина и линурона

2.6.6.2.1. Гидролитическое расщепление

К упаренным пробам после п. 2.6.3.3 и 2.6.3.6 добавляют 1 мл диэтиленгликоля, содержащего 4% KOH, и выдерживают на масляной бане при 180 °C в течение 15 мин.

2.6.6.2.2. Бромирование

К охлажденной смеси прибавляют 10 мл 1 н раствора серной кислоты, 0,5 мл 0,2% раствора мезидина, 0,5 мл 20% раствора бромида калия и 0,5 мл 1% раствора бромата калия. Содержимое тщательно перемешивают и помещают на 15 мин. в темное место. По окончании бромирования избыток брома удаляют небольшим количеством сульфита натрия безводного.

2.6.6.2.3. Выделение бромпроизводных

Раствор подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 1,5 мл) и экстрагируют 5 мл толуола. Аликвотную часть хроматографируют.

 

2.7. Обработка результатов анализа

 

Для определения препаратов методом абсолютной калибровки прежде всего определяют калибровочный коэффициент для каждого соединения по формуле:

 

                           H         H               H

                   1        1         2               n

               K = - x (------- + ------- + ... + -------),

                   n    c  x V    c  x V          c  x V

                         1    1    2    2          n    n

 

где:

n - число вводимых проб стандартных растворов;

H - высота пиков вещества, мм;

c - концентрация стандартных растворов, мкг/мл;

V - объем, вводимый в хроматограф, мкл.

Расчет содержания препарата в объекте производится по формуле:

 

                                    H x V

                                         1

                              X = ----------,

                                  K x V  x A

                                       2

 

    где:

    X - количество препарата в объекте, мг/кг;

    H - высота пика препарата, мм;

    V  - объем анализируемой пробы, мл;

     1

    K - калибровочный коэффициент, мм/нг;

    V  - хроматографируемый объем, мкл;

     2

    A - навеска пробы, г.

 

2.8. Техника безопасности

 

Необходимо соблюдать правила безопасной работы при использовании легковоспламеняющихся жидкостей (органические растворители), кислот и щелочей, токсических веществ (гербициды, гидразин-гидрат, мезидин), а также метанола.