Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5025-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАЛЛАТА В МАКЕ МАСЛИЧНОМ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны И.И. Пиленковой, Р.Г. Юрковой (ВНИТИГ).
Краткая характеристика препарата дана в Методических указаниях N 4032-85.
Принцип метода. Определение основано на извлечении триаллата из мака ацетонитрилом, переэкстракции его в гексан, очистке гексанового экстракта с помощью колоночной хроматографии и количественном определении методом газожидкостной хроматографии.
Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика приведена в таблице 95.
Таблица 95
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌──────────────────────────────────────────────┬───────────┬──────────────┐
│ Показатель │Семена мака│Коробочки мака│
├──────────────────────────────────────────────┼───────────┼──────────────┤
│Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг │0,01 - 1,00│0,005 - 1,00 │
│Предел обнаружения, мкг │0,02 │0,0002 │
│Предел определения, мг/кг │0,01 │0,005 │
│Среднее значение определения стандартных │75,0 │77,0 │
│количеств, % │ │ │
│Число параллельных определений n │6 │6 │
│Стандартное отклонение S, % │+/- 5,1 │+/- 5,0 │
│Доверительный интервал среднего (p = 0,95), % │+/- 7,6 │+/- 7,4 │
└──────────────────────────────────────────────┴───────────┴──────────────┘
Избирательность метода. Метод селективен. Определению не мешают фосфор- и хлорорганические пестициды, тиокарбаматы, симм-триазины и другие.
Реактивы, растворы (см. Методические указания N 4032-85). Хроматон N-AW-DMCS (0,2 - 0,25 мм) с 5% силикона DC-550. Азот особой чистоты в баллоне с редуктором.
Подготовка к определению. Приготовление стандартных растворов. Стандартные растворы триаллата: N 1 концентрацией 1 мг/мл (готовят, растворяя навеску 0,0250 г в 25 мл толуола в мерной колбе); N 2 концентрацией 0,001 мг/мл (готовят, разбавляя 0,1 мл стандартного раствора N 1 до 100 мл толуолом в мерной колбе); N 3 концентрацией 0,0001 мг/мл (готовят, разбавляя 10 мл стандартного раствора N 2 до 100 мл толуолом в мерной колбе). Срок хранения стандартных растворов 30 дней.
Приборы и посуда. Хроматограф с ДЭЗ. Колонки: хроматографическая стеклянная размером 0,3 x 200 см; адсорбционная стеклянная размером 0,8 x 30 см (заполняют при легком постукивании оксидом алюминия на высоту 10 см и пропускают 10 мл гексана под слабым вакуумом). Испаритель ротационный. Колбы: мерные, цилиндры, мензурки различной вместимости; грушевидные со шлифом на 100 мл для отгонки растворителя; Эрленмейера на 250 мл. Пипетки различной вместимости. Воронки: делительная на 500 мл; конусообразные; Бюхнера; Бунзена. Пробирки градуированные с пробками на шлифах. Мельница лабораторная (кофемолка). Микрошприц на 10 мкл.
Ход анализа. Экстракция. Навеску семян или коробочек мака (20 г) измельчают на кофемолке, помещают в колбу Эрленмейера и дважды экстрагируют ацетонитрилом (100 и 80 мл). Пробу фильтруют под вакуумом и промывают 30 мл ацетонитрила. Фильтрат концентрируют на ротационном испарителе при температуре не выше 45 °C до 50 мл и экстрагируют многократно гексаном порциями по 10 мл до тех пор, пока гексановый экстракт не станет бесцветным. Гексановые экстракты объединяют, концентрируют на ротационном испарителе при температуре не выше 45 °C до 1 - 2 мл. Остаток количественно переносят в хроматографическую колонку с оксидом алюминия, обмывая колбу дважды 1 - 2 мл гексана. Триаллат с сорбента элюируют 20 мл гексана. Гексановый элюат концентрируют при тех же условиях, что и экстракт: до 2 - 10 мл для семян мака и 1 - 10 мл для коробочек мака, и аликвоту раствора пробы вводят в хроматограф.
-11
Условия хроматографирования. Рабочая шкала электрометра 9 x 10 А.
Колонка хроматографическая стеклянная размером 0,3 x 200 см, заполненная
хроматоном N-AW-DMCS с 5% силикона DC-550. Температура, °Cтермостата
колонок - 180, испарителя - 250, детектора - 230. Расход газа-носителя
(азот особой чистоты) через колонку 40 мл/мин., через продувочную камеру
Детектора 60 мл/мин. Объем раствора пробы, вводимой в испаритель,
2 мкл. Абсолютное время удерживания триаллата 3,75 мин. Линейность
детектирования 0,0002 - 0,004 мкг. В этих же условиях хроматографируют
2 - 5 мкл стандартных растворов триаллата N 2 и N 3 (в зависимости от
размера пика пробы). Экстракты и стандартные растворы хроматографируют
трижды и вычисляют среднее значение высоты пиков.
Обработка результатов анализа. Содержание триаллата в пробе (X, мг/кг)
вычисляют по формуле:
100AH V
пр 2
X = ---------,
H V PR
ст 1
где:
A - количество триаллата в хроматографируемом объеме стандартного
раствора, нг;
H , H - средние высоты пиков соответственно на хроматограммах
пр ст
растворов пробы и стандарта, мм;
V - объем аликвоты раствора пробы, вводимой в прибор, мкл;
1
V - общий объем раствора пробы, мл;
2
P - навеска пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и пестицидами.