Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Геноцид собственного народа или зеленская чума 21 века 2024-04-27
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
Картинка недели
Указы СССР 1917-1992
Категории
Методические указания по определению тербацила в продуктах растительного происхождения, вине, виноградном соке, почве, воде хроматографи
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 562
Материал приурочен к дате: 1978-09-27
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1978-09-27 Материалы за: Год 1978
Автор: Мета Гость
Утверждены
Минздравом СССР
27 сентября 1978 г. N 1917-78
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТЕРБАЦИЛА В ПРОДУКТАХ
РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, ВИНЕ, ВИНОГРАДНОМ СОКЕ,
ПОЧВЕ, ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Краткая характеристика препарата. Тербацил - 3-трет-бутил-5-
хлор-6-метилурацил. Брутто-формула C H ClN O . Молекулярная масса
9 13 2 2
216,7. Химически чистое действующее вещество - бесцветные
кристаллы. Т. пл. 175 - 177 °C, давление пара 0,0625 МПа
(29,5 °C). Растворимость в воде 710 мг/кг (25 °C). Хорошо
растворим в диметилформамиде, циклогексаноне, умеренно - в
ксилоле. ДСД 0,01 <*>, МДУ 0,01 <*> (яблоки, груши), 0,05 мг/кг
(виноград).
--------------------------------
<*> Временный норматив.
Принцип метода. Метод основан на извлечении тербацила из пробы водным раствором гидроксида натрия, экстракции органическим растворителем из подкисленного раствора, очистке перераспределением в системах двух несмешивающихся жидкостей и хроматографировании на колонке с оксидом алюминия с последующим определением методом ГЖХ или ТСХ.
При анализе вина, виноградного сока, виноградной лозы метод основан на экстракции препарата смесью спирт - ацетон (1:3), очистке окрашенных растворов смесью активированного угля с оксидом алюминия с последующим определением методом ТСХ.
Метрологическая характеристика метода. Пределы обнаружения методом ГЖХ - 3 нг, что составляет: в воде - 0,002 - 0,005; почве - 0,03; яблоках, грушах - 0,02лимонах - 0,1 мг/кг или мг/л.
Доверительный интервал среднего определения: в воде - 89 +/- 5,6; почве - 78,5 +/- 6,1; растительном материале - 80,5 +/- 6,5%.
Пределы обнаружения методом ТСХ 2 - 5 мкг, что составляет: в воде - 0,01; почве - 0,1 - 0,15; в яблоках, грушах - 0,1; огурцах - 0,05; цитрусовых - 0,5; в вине, виноградном соке - 0,05; виноградной лозе, ее листьях, корнях, побегах - 0,1 - 0,2 мг/кг или мг/л.
Доверительный интервал среднего определения: в воде - 87 +/- 10, почве - 74 +/- 7, растительном материале - 70 +/- 9%.
Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Гексан х.ч. Хлороформ х.ч. Этиловый спирт-ректиф. Гидроксид натрия, 0,05 н и 1-процентные водные растворы. Серная кислота х.ч., 10 н раствор. Хлороводородная кислота. Сульфат натрия безводный х.ч. о-Толидин ч.д.а. Иодид калия х.ч. Марганцовокислый калий х.ч. Кислота уксусная ледяная х.ч. Крахмал водорастворимый ч.д.а. Силикагель КСК. Пластинки "Силуфол". Оксид алюминия 2-й степени активности для хроматографии. Сульфат кальция х.ч. Азот особой чистоты газообразный. Неподвижная фаза 5% SE-30 на хромосорбе W-DMCS (80 - 100 меш). Стекловата. Универсальная индикаторная бумага. Реактив для обнаружения тербацила N 1: 0,16 г о-толидина растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты и доводят дистиллированной водой до 500 мл, после чего прибавляют 1 г иодида калия. Реактив для обнаружения тербацила N 2: 50 мл 1-процентного водного раствора иодида калия смешивают с 50 мл свежеприготовленного 3-процентного раствора крахмала (раствор крахмала при приготовлении прокипятить). Прибавляют 20 мл этилового спирта. Реактив применять только свежеприготовленным.
Получение газообразного хлора: смешивают в эксикаторе 1,5-процентный раствор марганцовокислого калия и 10-процентный раствор соляной кислоты в равных объемах.
Стандартные растворы тербацила готовят в спирте - 200 мкг/мл; ацетоне - 100 и гексане - 1,5 и 10 мкг/мл.
Приборы и посуда. Газожидкостный хроматограф с ДЭЗ (например, "Цвет-106"). Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1 м и внутренним диаметром 3 мм. Микрошприц. Ротационный вакуумный испаритель. Аппарат для встряхивания. Водяная баня. Вакуумный водоструйный насос. Делительные воронки различной вместимости. Колбыгрушевидные или круглодонные на шлифах; конические; Бунзена. Воронки с пористыми фильтрами N 1 и 2 (шоттовские фильтры). Камера хроматографическая. Стеклянные пластинки размером 9 x 12 см. Сито капроновое 100 меш. Пульверизатор стеклянный. Камера для хлорирования (эксикатор или сосуд с внутренним диаметром 250 - 300 мм). Ступки фарфоровые. Ртутная кварцевая лампа. Сита металлические с диаметром отверстий 2 - 3 мм. Шкаф сушильный. Колонка стеклянная для распределительной хроматографии высотой 20 см и внутренним диаметром 18 - 20 мм.
Подготовка к определению. Приготовление хроматографических пластинок:
40 г силикагеля КСК (100 меш), 1 г водорастворимого крахмала и 125 мл дистиллированной воды. Крахмал заваривают в небольшом количестве воды (20 - 30 мл), доливают остальную воду, засыпают силикагель и хорошо перемешивают. Массу наносят равномерно на 15 пластинок;
оксид алюминия (50 г) и 5 г сульфата кальция (оба компонента просеивают через сито 150 меш) и 75 мл воды.
Ход анализа. Экстракция. Пробу яблок, груш, винограда (50 г)
измельчают, помещают в коническую колбу на 250 мл с притертой
пробкой и дважды экстрагируют препарат 0,05 н NaOH порциями по 80
мл на аппарате для встряхивания в течение 5 мин. Экстракты сливают
в делительную воронку, промывая пробу 2 раза по 20 мл 0,05 н NaOH.
К экстракту приливают 3 - 5 раз по 70 мл н-гексана, встряхивают по
2 мин. и гексан отбрасывают. Затем к экстракту прибавляют 7 мл 10
н H SO (pH 1 - 2), перемешивают и препарат трижды экстрагируют
2 4
хлороформом порциями по 75 мл, встряхивая по 2 - 3 мин. Экстракты
объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, количественно
фильтруют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при
температуре 45 - 50 °C.
К сухому остатку в колбочку прибавляют 30 мл гексана,
перемешивают 2 - 3 мин. и переносят в делительную воронку на 100 -
150 мл. После этого колбу промывают 2 раза 1-процентным NaOH
порциями по 25 мл, переносят в ту же делительную воронку,
энергично встряхивают 2 мин. и щелочной слой отделяют в колбочку,
а гексан сливают в другую делительную воронку. Затем щелочной
экстракт снова переносят в делительную воронку и дважды промывают
его гексаном порциями по 30 мл, а потом 2 раза хлороформом по 30
мл, встряхивая по 1 - 2 мин. Промывные жидкости объединяют,
приливают к ним 20 мл 1-процентного NaOH, осторожно перемешивают 1
- 2 мин. и после разделения фаз щелочной слой присоединяют к
очищенному экстракту, а смесь растворителей отбрасывают. К
экстракту прибавляют 3,5 мл 10 н H SO , перемешивают и
2 4
экстрагируют тербацил трехкратным встряхиванием с 50 мл хлороформа
в течение 2 - 3 мин. Экстракты объединяют, сушат над сульфатом
натрия и растворитель отгоняют до объема 0,5 - 1 мл. Остаток
количественно переносят на колонку с оксидом алюминия. Колонку
готовят, засыпая 15 г оксида алюминия II степени активности,
сульфат натрия безводный на 2 см, и промывают 30 мл хлороформа.
Гербицид элюируют хлороформом, отбрасывая первые 20 мл и собирая
35 - 40 мл элюата. Элюат упаривают на ротационном испарителе
досуха. Для ТСХ добавляют 0,2 - 0,5 мл хлороформа, для ГЖХ - 1 - 3
мл гексана.
Пробу лимонов (10 - 15 г) [1] измельчают и дважды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Объединенный хлороформный экстракт осушают над сульфатом натрия безводным и упаривают досуха на ротационном испарителе. Сухой остаток растворяют в 30 мл гексана, фильтруют через бумажный фильтр, а остаток обрабатывают еще 20 мл гексана, который также отфильтровывают. Объединенный гексановый экстракт обрабатывают 50 мл 1-процентного раствора NaOH. Далее поступают так, как описано выше.
Из воздушно-сухой почвы (30 - 50 г) [1], предварительно просеянной через сито с диаметром отверстий 2 - 3 мм, препарат дважды экстрагируют 0,05 н раствором NaOH порциями по 70 мл на аппарате для встряхивания в течение 5 мин. Экстракты фильтруют через воронку Бюхнера (диаметром 10 - 12 см) под вакуумом. Осадок на воронке промывают 50 мл раствора едкого натра, экстракт переносят в делительную воронку и экстрагируют 3 - 5 раз гексаном порциями по 70 мл. Дальнейший ход анализа аналогичен вышеописанному.
Пробу воды (200 - 500 мл) [1] помещают в воронку, подкисляют 10 н серной кислотой до pH 1 - 2 и препарат экстрагируют хлороформом трижды порциями по 75 мл хлороформа в течение 3 - 5 мин. Растворитель объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и отгоняют в условиях, указанных выше.
Измельченную пробу мандаринов, апельсинов (50 г без кожуры) [2] заливают хлороформом и в течение 1 ч экстрагируют на аппарате для встряхивания. Растворитель отфильтровывают, остаток промывают трижды хлороформом по 20 мл. Весь хлороформенный экстракт пропускают через колонку с оксидом алюминия, предварительно промытую 15 мл хлороформа. Диаметр колонки 19 - 20 мм, высота слоя сорбента 75 мм. После элюирования всего хлороформенного экстракта колонку промывают 25 мл хлороформа и весь элюат концентрируют до 0,1 мл.
Навеску чистых вымытых огурцов (50 г) [2] измельчают, подкисляют 10 н серной кислотой до pH 2 - 3, заливают хлороформом и 1 ч встряхивают. Экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия, пробу трижды промывают 20 мл хлороформа. Объединенный экстракт помещают в колбу прибора для отгонки растворителя и отгоняют до 0,1 мл.
Экстракцию почвы, зеленых листьев, виноградной лозы (побеги и корни) [3] проводят следующим образом. Навеску воздушно-сухой, просеянной через сито с диаметром отверстий 1 - 2 мм почвы (100 г) заливают смесью спирта с ацетоном (1:3) до покрытия пробы и оставляют на ночь в колбе с притертой пробкой или экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 2 ч. Полученный раствор отфильтровывают под вакуумом. Остаток в колбе и на фильтре трижды промывают небольшими порциями растворителя. Общий экстракт упаривают до небольшого объема и хроматографируют. Сильно окрашенные растворы обесцвечивают путем добавления активированного угля (5 г) или смеси его с окисью алюминия (5 г угля и 7 - 8 г окиси алюминия).
Навеску листьев (10 г), корней или побегов (20 г) растирают с кварцевым песком и безводным сульфатом натрия, заливают той же смесью спирта с ацетоном и обрабатывают аналогично пробам почвы. После добавления сорбента вытяжку для лучшего ее обесцвечивания выдерживают 30 мин. на водяной бане при 30 - 40 °C, затем перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 1 ч или оставляют на ночь. После этого раствор высушивают сульфатом натрия, упаривают и хроматографируют.
Вино, виноградный сок, воду (100 мл анализируемой пробы) [3] помещают в колбу прибора для отгонки растворителя под вакуумом и упаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 10 - 15 мл охлажденной смеси этанол - ацетон (1:3). Встряхивают и фильтруют через воронку с фильтром, заполненную сульфатом натрия безводным. Операцию повторяют еще дважды. Объединенный спиртово-ацетоновый раствор упаривают до объема 0,1 мл и хроматографируют.
Газожидкостная хроматография. Используется для количественного определения содержания тербацила в пробах, обозначенных знаком [1].
Условия хроматографирования. Хроматограф с ДЭЗ. Рабочая шкала
-12
электрометра 20 x 10 А. Скорость движения ленты самописца 240
мм/ч. Колонка стеклянная размером 1 м x 3 мм. Неподвижная фаза -
5% SE-30 на хромосорбе W-DMCS (80 - 100 меш). Температура, °C:
термостата колонок - 190; детекторов - 210; испарителя - 220.
Расход газов (азот особой чистоты) - 40; на поддувку - 120 мл/мин.
Объем пробы, вводимой в хроматограф, 2 - 6 мкл. Линейный
динамический диапазон 3 - 25 нг. Минимально детектируемое
количество 3 нг. Время удерживания 1,65 мин.
Тонкослойная хроматография. Используется для количественной
оценки содержания тербацила в пробах, обозначенных знаками [2] и
[1] (можно использовать гексановый экстракт после ГЖХ).
На пластинку с силикагелем наносят пробы и стандартные
растворы тербацила и хроматографируют в системе гексан -
этилацетат (3:2). После хроматографирования пластинку оставляют на
воздухе до полного удаления запаха растворителей и помещают под
ртутно-кварцевую лампу на расстоянии 18 - 20 см на 15 мин. Затем
пластинку помещают в камеру для хлорирования на 2 - 5 мин.
(работать под тягой!) и после улетучивания хлора с проветренной
пластинки опрыскивают раствором о-толидина (реактив N 1). При этом
на светлом фоне проявляются темно-синие пятна тербацила с R
f
0,55 +/- 0,05.
При использовании системы хлороформ - ацетон (3:1) в качестве
альтернативной величина R тербацила 0,67 +/- 0,05.
f
Экстракты проб, обозначенные знаком [2], хроматографируют на
пластинках с оксидом алюминия или пластинках "Силуфол". В качестве
подвижной фазы используют смеси гексан - хлороформ - уксусная
кислота (6:7:3) или гексан - ацетон - уксусная кислота (6:7:3).
После хроматографирования и высушивания на воздухе пластинки
помещают в камеру с газообразным хлором на 3 - 5 мин. Через 30 -
40 мин. пластинку опрыскивают йод-крахмальным реагентом (реактив N
2). Величина R тербацила на оксиде алюминия 0,57 - 0,6, на
f
пластинках "Силуфол"- 0,4 - 0,45 и 0,6 - 0,65 соответственно для
указанных выше систем.
Обработка результатов анализа. Газожидкостная хроматография.
Содержание препарата в пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по
методу абсолютной калибровки по формуле:
100 H V
пр 1
X = ----------,
K V P
2
где:
H - высота пика препарата в пробе, мм;
пр
V - объем анализируемой пробы, мл;
1
V - объем хроматографируемой пробы, мкл;
2
P - навеска или объем, г или мл;
K - калибровочный коэффициент, мм/нг, определяется по формуле:
H H H
1 1 2 3
K = - (--- + --- + ---),
3 CV CV CV
1 2 3
где:
C - концентрация стандартного раствора, вводимого в
хроматограф, мкг/мл (нг/мкл);
V , V , V - объемы стандартного раствора, мкл;
1 2 3
H , H , H - высоты пиков препарата, мм.
1 2 3
Тонкослойная хроматография. Количество препарата определяют путем сравнения размера пятен и интенсивности их окраски проб и стандартных растворов. Содержание препарата в пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле:
100A
X = ----,
P
где:
A - количество препарата, найденное путем визуального сравнения со стандартом, мкг;
P - навеска или объем, г или мл.
Остальные материалы раздела: Указы СССР 1917-1992
Предыдущая Указ Президиума ВС СССР от 07.09.1978 Об административной ответственности за нарушение правил открытия полиграфических и штемпельно-граверныСледующая Методические указания по определению этрела и его производных гидрела. дигидрела в яблоках. огурцах. томатах. зерне злаков. семенах хлопча