Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6243-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПОТЕЙТИНА (ИВИН-ЯН) В ВОДЕ, ПОЧВЕ,
КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ И РАСТЕНИИ ПОДСОЛНЕЧНИКА
ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата Потейтин (Ивин-Ян)
Пороговое название: Потейтин (Ивин-Ян).
Химическое название: комплекс N-оксида 2,6-лутидина с янтарной кислотой.
// \
│ ││ HOOC(CH ) COOH
│ ││ 2 2
/ \\ /\
/ \
H C CH
3 3
Эмпирическая формула C H NO .
11 15 5
Молекулярная масса 241,24.
Белое кристаллическое вещество с едва уловимым запахом N-оксида 2,6-лутидина.
Температура плавления 76 °C, неограниченно растворим в воде и этиловом спирте.
Потейтин устойчив в течение двух лет при хранении в герметичной посуде при температуре 20 +/- 5 °C и влажности не более 80%.
ЛД 4550 мг/кг. Регулятор роста, применяется на картофеле
50
путем предпосевной обработки клубней 0,001-процентным водным
раствором. Расход рабочего раствора 20 - 30 л/т для обработки
растений подсолнечника в фазу 6 - 10 листьев с нормой расхода 300
- 400 л/га по д.в. 4 г/га.
МДУ (по ивину): томаты, огурцы - 0,04 мг/кг; в воде ОДУ 0,02 мг/л; ОБК в почве 0,1 мг/кг.
2. Методика определения Потейтина в воде, почве,
зеленой массе картофеля и подсолнечника, клубнях картофеля
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении потейтина из растений и почвы дистиллированной водой, подкисленной соляной кислотой до pH 3 - 4, нейтрализации водной вытяжки гидроксидом калия, экстракции бензолом, упаривании бензола и определении в тонком слое адсорбента.
2.1.2. Метрологическая характеристика
Минимальное детектируемое количество - 0,07 мкг.
Диапазон определяемых концентраций - 0,0007 - 0,05 мг/г:
в воде - 0,0007 - 0,05 мг/л;
почве - 0,005 - 0,05 мг/кг;
клубнях картофеля - 0,005 - 0,05 мг/кг;
ботве картофеля - 0,001 - 0,05 мг/кг;
растениях подсолнечника - 0,001 - 0,05 мг/кг;
семенах подсолнечника - 0,007 - 0,04 мг/кг;
масле подсолнечника - 0,007 - 0,05 мг/кг.
Среднее значение определения, %: вода - 89 - 91;
почва - 79 - 83; клубни картофеля - 74 - 78;
ботва - 87 - 89; растения подсолнечника - 87 - 90.
2.2. Реактивы и растворы
Бумага фильтровальная.
Бензол, ГОСТ 5955-75.
Бутанол 1, ГОСТ 6006-75.
Гидроксид калия, СТ СЕВ 1430-78 (ЧССР).
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Соляная кислота, ГОСТ 3118-77.
Уксусная кислота, ГОСТ 61-75.
Этанол, ГОСТ 5962-67.
Пластинки "Силуфол"(ЧССР).
Стандартные растворы Потейтина в этиловом спирте: 0,1 г Потейтина растворяют в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Рабочие растворы готовят разбавлением полученного 0,1% раствора в 100 и 1000 раз, содержащие 10 и 1 мкг в 1 мл. Растворы хранят в холодильнике 5 - 6 дней.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-33.
Весы технические.
Весы аналитические 2 кл., ГОСТ 19491-74.
Колбы плоскодонные на 100 куб. см, ГОСТ 25336-82.
Колбы круглодонные на 100 куб. см, ГОСТ 25336-82.
Колбы конические на 100 куб. см и 50 куб. см, ГОСТ 177-74.
Колбы остродонные на 50 куб. см, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные 2-100-2, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100, 50 и 25 мл.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.
Пипетки мерные 8-2-1, 8-2-2, 8-2-10, ГОСТ 20292-74.
Микропипетки на 0,1, ГОСТ 20-292-74.
Микрошприц на 10 мкл.
Вакуумный насос, ГОСТ 23932-79.
Водоструйный насос, ГОСТ 23932-79.
Хроматоскоп.
Электроплита, ТУ 92-275-76.
Чашки фарфоровые, ГОСТ 9147-80.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
2.4. Подготовка к определению
Подготовить пластинки "Силуфол" ИУ 254 размером 5 x 10.
Хроматографическую камеру за 1 час до начала хроматографирования заполнить подвижной фазой до уровня 0,5 - 0,7 см. Для контроля насыщения парами элюента в камеру можно опустить полоску фильтровальной бумаги шириной 5 см.
2.5. Отбор проб
Пробы для анализа отбираются в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными зам. Главного государственного санитарного врача СССР за N 2051-79 от 21.08.1979.
2.6. Проведение определения
2.6.1. Вода
200 - 250 мл воды подщелачивают до pH = 8. Переносят через бумажный фильтр в делительную воронку. Дважды 5 мл бензола промывают колбу, фильтр и проводят экстракцию из воды потейтина.
Экстракты объединяют, упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят на пластинку. Рядом наносят стандартные растворы, содержащие 0,07 - 0,1 мкг потейтина.
2.6.2. Почва
10 - 15 г воздушно-сухой почвы растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу на 100 мл, заливают 25 - 50 мл дистиллированной воды, подкисленной соляной кислотой до pH 3 - 4 по лакмусу, и оставляют на ночь. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр, промывают почву по 10 мл водой 2 раза и объединяют с экстрактом. Подщелачивают почвенный экстракт до pH 7,5 - 8 гидроксидом калия и переносят через бумажный фильтр в делительную воронку. Смывают колбу и фильтр 10 мл бензола (дважды). Экстрагируют потейтин бензолом дважды по 10 мл. Экстракт упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят на пластинку. Рядом наносят такие же объемы стандартных растворов.
2.6.3. Картофель (клубни, ботва) и листья подсолнечника
10 - 20 г образца измельчают, переносят в коническую колбу и заливают 50 - 100 мл подкисленной до pH 3 - 4 воды. Встряхивают в течение 1 часа, фильтруют через колонку с окисью алюминия. Фильтрат подщелачивают до pH 7,5 - 8 гидроксидом калия, переносят через бумажный фильтр в делительную воронку. Споласкивают колбу и фильтр дважды по 10 мл бензола. Экстрагируют потейтин бензолом два раза по 10 мл бензола. Экстракты объединяют, упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят на пластинку. Рядом наносят стандартные растворы.
2.6.4. Подсолнечник (семена)
10 - 20 г образца очищают от шелухи, растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 50 мл дистиллированной воды, подкисленной до pH 3 - 4. Встряхивают в течение 1 - 2 часов, затем фильтруют через бумажный фильтр, промывают дважды по 10 мл дистиллированной водой. Фильтрат подщелачивают до pH 7,5 - 8 гидроксидом калия и переносят через бумажный фильтр в делительную воронку. Споласкивают колбу и фильтр дважды по 10 мл бензолом. Экстрагируют потейтин бензолом два раза по 5 мл. Бензольный экстракт упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл и наносят количественно на пластинку. Рядом наносят стандартные растворы.
2.6.5. Подсолнечник (масло)
10 - 20 г образца встряхивают с 50 мл подкисленной до pH 3 - 4 дистиллированной воды. Отделяют на делительной воронке водный слой. Промывают 2 раза по 5 мл дистиллированной водой. Водный экстракт объединяют, подщелачивают до pH 7 - 8, переносят через бумажный фильтр в делительную воронку и проводят дальнейшее определение, как в семенах.
2.6.6. Хроматографирование
Пластинку с нанесенными анализируемыми пробами и стандартными
растворами помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой,
соотношение бутанол 1:уксусная кислота:вода (7:3:1). Когда
растворитель достигнет линии фронта, пластинку вынимают, помещают
на водяную баню на 1 час до удаления запаха кислоты, сушат на
воздухе. Просматривают пластинку под хроматоскопом. Потейтин
светится малиновым цветом на светлом фоне. R = 0,4 +/- 0,48.
f
2.7. Обработка результатов анализа
Содержание препарата в пробе, мг/кг, рассчитывают по формуле:
A x S x 1000
2
X = -------------,
S x P
1
где:
A - содержание пестицида в стандарте, мкг;
S - площадь пятна стандарта, кв. мм;
1
S - площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - масса пробы, взятой в анализе.
3. Требования безопасности
Соблюдать требования безопасности, рекомендуемые для работы с химическими реактивами и пестицидами.