Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Геноцид собственного народа или зеленская чума 21 века 2024-04-27
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
Картинка недели
Указы СССР 1917-1992
Категории
Методические указания по определению актеллика в растительном материале, в почве и в воде хроматографией в тонком слое и на газовом хромат
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 726
Материал приурочен к дате: 1979-10-19
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1979-10-19 Материалы за: Год 1979
Автор: Мета Гость
Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
19 октября 1979 г. N 2085-79
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АКТЕЛЛИКА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ,
В ПОЧВЕ И В ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ
И НА ГАЗОВОМ ХРОМАТОГРАФЕ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
1.1. Актеллик
1.2. 0,0-диметил-0-(диэтиламино-6-метилпиримидил-4)тиофосфат
1.3. Структурная формула:
CH O S CH
3 \|| --- / 3
P-O-// \\N
/ \ ___ /
CH O N --- C H
3 \ / 2 5
N
\
C H Мол. масса = 305,35.
2 5
1.4. Пиримифос-метил, ПП-511, актеллик
1.5. Химически чистое вещество актеллика представляет собой жидкость
светло-желтого цвета. Хорошо растворяется в большинстве органических
растворителей, слабо растворим в воде - 5 мг/л при температуре 30°.
-4
Удельный вес - 1,157 при 30°, давление пара - 1 х 10 . Разрушается в
сильнокислых и щелочных средах.
Препарат малотоксичен для теплокровных животных - при оральном введении
ЛД для мышей составляет 1180 мг/кг. Препарат опасен для птиц (ЛД 30 -
50 50
60 мг/кг) и рыб (ЛД 0,3 - 27 мг/кг).
50
Выпускается в форме 25-процентного концентрата эмульсии, 25-процентного препарата для ультрамалообъемного опрыскивания.
2. Методика определения актеллика
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении актеллика из растительных проб и воды
органическими растворителями (хлороформом, 10 - 20-процентным ацетоном в
гексане или 50-процентным водным ацетоном). Из почвы экстрагируют
инсектицид смесью ацетона с 0,05 н раствором CaCl . Очистка экстрактов
2
способом перераспределения между двумя несмешивающимися растворителями и на
хроматографических колонках. Количественное определение проводят
хроматографическим в тонком слое методом или на газовом хроматографе с
термоионным детектором.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
ГЖХ ТСХ
Минимально детектируемое количество 10 нг 0,5 - 3 мкг
Нижний предел определения 0,002 мг/кг 0,1 мг/кг
P - размах варьирования, %
в растениях 85,0 - 91,0 86,0 - 91,5
в почве 92,5 - 97,5 92,5 - 97,6
_
с - среднее значение определения, %
в растениях 88,5 85,5
в почве 95,0 95,0
S - стандартное отклонение, %
в растениях 2,5 2,5
в почве 2,5 2,5
Доверительный интервал среднего при
P = 0,95 и n = 5, %
для растений 88,5 +/- 2,5
для почвы 95,0 +/- 2,5
2.1.3. Избирательность метода
Другие фосфорорганические инсектициды определению не мешают.
2.2. Реактивы и растворы
Хлороформ, х.ч., ГОСТ 3160-51, - CHCl .
3
Гексан, х.ч., МРТУ 6-09-2937-66, - CH (CH ) CH .
3 2 4 3
Ацетон, ч., ГОСТ 2603-63, - CH COCH .
3 3
Ацетонитрил, ч., МРТУ 6-09-6448-69, - CH CN.
3
Диметилформамид, ч., МРТУ 6-09-2068-65, - HCON(CH ) .
3 2
Бензол, ч.д.а., ГОСТ 5955-68, - C H .
6 6
Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-66, - Na SO .
2 4
Уголь активированный марки КАД - молотый или ОУ-А.
Окись алюминия для хроматографии, МРТУ 6-09-5296-68-4, - Al O .
2 3
Силикагель КСК или пластинки "Силуфол UV-254".
5% SE-30 на хроматоне N-AW-ДМСS (0,16 - 0,20 мм).
Азот, осч.
Водород.
Проявляющие реагенты:
0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в гексане, после опрыскивания нагревание пластинки при 110° в течение 5 мин.
0,5-процентный раствор бриллиантового зеленого в ацетоне, затем экспозиция пластинки в парах брома 20 - 30 сек.
0,05-процентный раствор бромфенолового синего в 0,5-процентном растворе азотнокислого серебра, приготовленного на ацетоне. После проветривания хроматограммы и прогревания ее в термостате при 35 - 40° вновь опрыскивают 5-процентным раствором уксусной кислоты (лимонной кислоты).
2-процентный раствор 4-(P-нитробензил)пиридина в ацетоне после нагревания хроматограммы при 110° в течение 5 мин. вновь опрыскивают 10-процентным раствором тетраэтиленпентамина в ацетоне.
Реактив Драгендорфараствор А - 0,85 г азотнокислого висмута растворяют в смеси 40 мл дистиллированной воды и 100 мл 40-процентной серной кислоты (серную кислоту можно заменить 10 г винной кислоты); раствор Б - 8 г йодистого калия растворяют в 20 мл воды. Растворы А и Б смешивают. Перед употреблением к 6 мл полученной смеси приливают 6 мл 20-процентной серной кислоты (или 12 г винной кислоты) и доводят объем до 25 мл водой.
Стандартный раствор актеллика в ацетоне или в гексане - 1,0 - 5,0 мкг/мл.
2.3. Приборы и посуда
Колбы конические со шлифами и пробками на 50 и 250 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы круглодонные со шлифами для отгонки растворителей, ГОСТ 10394-72.
Делительные воронки на 50 и 100 мл, ГОСТ 8613-75.
Воронки, ГОСТ 8613-75.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.
Колонки для адсорбционной хроматографии (300 х 15 мм), МРТУ 42-2590-66.
Аппарат для встряхивания колб.
Ротационный вакуумный испаритель, МРТУ 42-2589-66.
Холодильник бытовой.
Термостат.
Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-63.
Микропипетки 0,1 - 0,2 мл, ГОСТ 20292-74.
Хроматоскоп (хемоскоп).
Камера для опрыскивания, ГОСТ 10565-63.
Опрыскиватель, ГОСТ 19391-68.
Микрошприцы на 10 мкл.
Газовый хроматограф с термоионным детектором (ДТИ).
2.4. Подготовка к определению
Растительную пробу (овощи, фрукты, зеленую массу) измельчают ножом на кусочки 0,5 х 0,5 х 0,5 куб. см и отбирают среднюю пробу 25 г.
Почву в естественном состоянии или воздушно-сухую просеивают через сито и для анализа отбирают 10 г.
Проба воды - 100 мл.
2.5. Проведение определения
2.5.1. Экстракция и очистка экстрактов
Анализируемые навески помещают в конические колбы емкостью 250 мл, пробы воды - в делительные воронки, куда добавляют по 10 г хлористого натрия.
Из растений актеллик экстрагируют трижды по 50 мл 20-процентного ацетона в гексане либо 50-процентным водным ацетоном, либо 50 мл хлороформа; из почвы - 50 мл смеси ацетона с 0,05 н водным раствором хлористого кальция (1:1); из воды - хлороформом порциями: 120, 100, 75 мл. Экстрагируют при встряхивании в течение 1 часа. Экстракты отфильтровывают через бумажный фильтр. Объединенные экстракты помещают на 1 час в холодильник. При выпадении осадка пробы следует отфильтровать вторично. Экстракты подвергаются очистке:
а) очистка после экстракции 20-процентным ацетоном в гексане. Экстракт помещают в делительную воронку и отделяют водно-ацетоновую фракцию от гексановой. Водно-ацетоновую фракцию промывают гексаном еще два раза. Объединенные гексановые экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, концентрируют под вакуумом при 40 - 50° до 5 мл. После охлаждения добавляют к ним 5 мл холодного ацетонитрила. Ацетонитрил можно заменить диметилформамидом, однако с первым растворителем очистка происходит значительно лучше. Пробу встряхивают 1 - 2 мин. Гексановый слой отделяют в делительной воронке и вторично дважды чистят пробу ацетонитрилом (диметилформамидом), если это необходимо. Ацетонитрильные (диметилформамидные) экстракты объединяют, переносят в делительную воронку, добавляют к ним 30 мл воды и 20 мл гексана, встряхивают 1 - 2 мин. и после разделения слоев гексановый отделяют, а водно-ацетонитрильный еще раз промывают гексаном и отбрасывают. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сернокислым натрием путем фильтрования и концентрируют под вакуумом до 5 мл. Если проба очищена недостаточно, то ее следует пропустить через колонку (30 см х 1,5 см), заполненную слоем сернокислого натрия (2 - 3 см), окиси алюминия для хроматографии (3 см), активированного угля КАД - молотый или ОУ-А (3 см) и безводного сернокислого натрия (1 см). Предварительно через колонку пропускают 40 - 50 мл хлороформа для уменьшения сорбционной емкости угля. Из колонки актеллик элюируют 120 мл хлороформа при отсасывании с помощью водоструйного насоса. Хлороформ концентрируют до объема 0,3 - 0,5 мл и количество инсектицида определяют хроматографическими методами;
б) очистка после экстракции хлороформом. Полученный экстракт фильтруют
через слой безводного сернокислого натрия и концентрируют под вакуумом до
0,5 - 1,0 мл. Остаток растворителя испаряют на воздухе. К сухому остатку
приливают 30 мл смеси ацетона с 0,05 н CaCl (соотношение компонентов 1:1),
2
пробу переносят в делительную воронку, фильтруя через бумажный фильтр,
колбу споласкивают еще 20 мл смеси ацетона с CaCl . В воронку добавляют 30
2
мл гексана для извлечения токсиканта. Гексановую фракцию отделяют,
водосолеацетоновую промывают еще два раза гексаном по 20 мл. Объединенный
гексановый экстракт фильтруют через безводный сернокислый натрий и
концентрируют до 0,3 - 1,0 мл. Если проба очищена недостаточно, то ее
дополнительно чистят на колонке, как указано выше;
в) очистка после экстракции водным ацетоном. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, добавляют 30 мл гексана для извлечения токсиканта. Далее поступают так, как описано в способе очистки "б".
Экстракты из почвы очищают путем переэкстракции в н-гексане (смотри способ "б").
2.5.2. Хроматография в тонком слое
На расстоянии 2 см от нижнего края хроматографической пластинки с тонким слоем силикагеля, в который внесен флуоресцеин, или на "Силуфол UV-254" наносят сконцентрированные экстракты проб и стандартный раствор актеллика в виде пятен диаметром не более 0,5 см. Если в пробе содержится много инсектицида, то рекомендуется брать часть пробы или наносить экстракт в 4 - 5 точек. Стенки колб тщательно смывают несколькими каплями растворителя, который также наносят в центр пятна. Хроматографические пластинки ставят в камеру для хроматографирования и ожидают, пока фронт растворителя поднимется на высоту 10 см. Хроматографируют в системе гексан - ацетон (5:1) или гексан - этилацетат (7:3). Далее пластинку подсушивают на воздухе и проявляют одним из проявляющих реагентов. Следует указать, что наибольшей чувствительностью обладает проявитель с 2,6-дибром-N-хлорхинонимином и 4-(P-нитробензил)пиридином.
Пластинки со слоем силикагеля, в который внесен флуоресцирующий краситель, или пластинки "Силуфол UV-254" можно просматривать в хроматоскопе, не проявляя их. Инсектицид определяют по тушению флуоресценции.
R актеллика в системе гексан - ацетон (5:1) составляет 0,75, а в
f
системе гексан - этилацетат (7:3) - 0,51.
Содержание актеллика в исследуемом объекте вычисляют по формуле:
A х 1000
X = --------,
P
где:
X - содержание препарата в пробе, мг/кг;
A - количество препарата, найденное в пробе при сравнении со стандартом, мкг;
P - навеска исследуемой пробы, г.
2.5.3. Газохроматографическое определение
После отгонки растворителя к сухому остатку добавляют 1 или <...> мл гексана, колбу закрывают пробкой, тщательно обмывая ее внутреннюю поверхность. Аликвотную часть пробы (2 - 5 мкл) вводят в испаритель хроматографа.
Условия хроматографирования: хроматограф с термоионным детектором
(ДТИ), колонка стеклянная, заполненная 5% SE-30 на хроматоне N-AW-ДМСS
(0,16 - 0,20 мм). Температура колонки 190°, испарителя 230°. Скорость газа-
-11
носителя азота 60 мл/мин. Фоновый ток (1 - 4) х 10 А, рабочая шкала
-10
электрометра 2,5 х 10 А. Время удерживания актеллика в указанных
условиях 2,8 мин.
Содержание актеллика в пробе определяют методом стандартов и
рассчитывают по формуле:
H х V х C х V
2 1 1 3
X = -----------------,
H х V х P
1 2
где:
X - количество препаратов в пробе, мг/кг;
C - количество препарата в стандартном растворе, мкг/мл;
1
H - высота пика стандартного раствора, мм;
1
H - высота пика анализируемого раствора, мм;
2
V - объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, мкл;
1
V - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф, мкл;
2
V - объем экстракта пробы для анализа, мл;
3
P - навеска пробы, г.
2.6. Обработка результатов анализа приведена в 2.5.2 и 2.5.3.
2.7. Авторы
Настоящая методика включает разработки авторских коллективов:
1. Петрова Т.М., Андреев Ю.Б., Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений, г. Ленинград.
2. Красных А.А., Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, пос. Рамонь Воронежской области.
Остальные материалы раздела: Указы СССР 1917-1992
Предыдущая Методические указания по определению нортрона в воде. черноземной почве и сахарной свекле утв. Минздравом СССР 19.10.1979 N 2083-79Следующая Методические указания по определению остаточных количеств хлората магния полярографическим методом утв. Минздравом СССР 19.10.1979 N 2087-79