Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6171-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-МЕТОКСИКАРБОНИЛ-N-(4,6-ДИМЕТИЛ
1,3-ПИРИМИДИН-2-ИЛ)-АМИНОКАРБОНИЛ-БЕНЗОЛСУЛЬФАМИДА
И ЕГО КАЛИЕВОЙ СОЛИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
2-Метоксикарбонил-N-(4,6-диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамид является полупродуктом для получения отечественных препаратов Анкор-5 и Анкор-85 и представляет собой тонкодисперсный порошок белого или светло-серого цвета.
Структурная формула:
___ COOCH N___ CH
--- / 3 --- / 3
/ \ / \
\\ //-SO -NH-CO-NH-\\ //
--- 2 │ / --- \
K N CH
3
Калиевая соль анкора.
Эмпирическая формула: C H N O KS.
15 18 4 5
Молекулярная масса: 402,5.
Растворимость при 295,5 °К (22,5 °C) в г/л растворителя:
Анкор Калиевая соль анкора
-3
1. Вода 8,0 x 10 0,72
2. Ацетон 5,2 0,10
3. Хлороформ 8,5 0,14
Упругость паров при 293 °К (20 °C):
Анкор Калиевая соль анкора
-7 -8
1 x 10 мм рт. ст. 5 x 10 мм рт. ст.
В воздухе рабочей зоны анкор и его калиевая соль могут присутствовать только в виде аэрозоля.
При pH 2 - 3 калиевая соль анкора переходит в ионизированное состояние, т.е. в анкор, в результате чего растворимость в воде уменьшается, а в органических растворителях резко возрастает.
ЛД для крыс - 20000 мг/кг.
50
ОБУВ калиевой соли анкора для воздуха рабочей зоны - 1,00 мг/куб. м.
2. Методика определения анкора в воздухе рабочей зоны
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Определение основано на улавливании аэрозоля вещества на бумажный фильтр "синяя лента", экстракции его с фильтра смесью ацетон:хлороформ (1:1), концентрировании вещества с помощью упаривания растворителя и последующем определении его методом жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора при 226 нм на колонке, заполненной насадкой "Силасорб-600".
2.1.2. Избирательность метода
Метод обеспечивает полную селективность. Определению не мешают полупродукты получения.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода
Диапазон измеряемых концентраций в воде - от 0,50 до 5,0 мг/куб. м.
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме - 0,2 мкг.
Нижний предел измерения в воздухе рабочей зоны - 0,5 мг/куб. м.
Суммарная погрешность не превышает 20,0%.
Время выполнения определения (включая отбор образца) анкора в одной пробе при одновременной подготовке двух параллельных образцов - 40 мин.
2.2. Реактивы, растворы и материалы
Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-82.
Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.
Спирт метиловый хч, ТУ 6-09-1709-77.
Спирт изопропиловый хч, ТУ 6-09-402-81.
Гептан нормальный эталонный, ГОСТ 5.395-70.
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 61-75, раствор 1:10 в изопропиловом спирте.
Гидроокись натрия хч, ГОСТ 4328-77, 5% раствор.
Бумага индикаторная универсальная.
Окись бария ч, ГОСТ 10203-78.
Анкор - образец сравнения - с содержанием не ниже 98%.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф "Милихром" с УФ-детектором, ТУ 25-05-2095-77.
Потенциометр ЛКСУ-003, ТУ 25-05-2095-77.
Колонка металлическая 6,3 см с внутренним диаметром 2 мм, заполненная силикагелем "Силасорб-600", с размером частиц 5 мкм.
Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100, 50 и 25 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10, 5, 2 мл с делениями.
Делительные воронки вместимостью 1000 мл, ГОСТ 25336-82.
Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Колбы грушевидные вместимостью 50 мл, ГОСТ 9737-70.
Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82.
Чашка фарфоровая вместимостью 250 мл, ГОСТ 9147-73.
Холодильник Х111-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.
Линейка измерительная, цена деления 1 мм, ГОСТ 4272-75.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Регулятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ 111378-77.
Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ 9871-61.
Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена деления 1 °C.
Секундомер механический СОП-пр. 2а3-000, ГОСТ 5072-79.
Барометр ВК-75, ТУ 35-04-223-75, цена деления 0,1 кПа.
Весы аналитические, лабораторные, общего назначения, тип ВЛА-200М, ТУ 25-06-1049-72.
Весы лабораторные, технические ВЛКТ-500М, 4-ый класс, ГОСТ 24104-80.
Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82.
Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82.
Шкаф сушильный электрический 2В-151, ТУ 64-1-1411-76.
Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ 7148-70.
2.4. Отбор пробы
50 литров воздуха аспирируют со скоростью 5 л/мин. через обеззоленный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Приготовление стандартного и градуировочных растворов
Стандартный раствор анкора
1,0 мг/мл - раствор N 1.
Стандартный раствор N 1 используют для приготовления градуировочных растворов. Для приготовления стандартного раствора N 1 50 мг анкора взвешивают в мерную колбу вместимостью 50 мл на аналитических весах, записывая результат до четвертого знака, растворяют навеску в хлороформе, доводят объем жидкости до метки хлороформом, тщательно перемешивают содержимое колбы и рассчитывают концентрацию стандартного раствора с учетом чистоты вещества. Затем, используя стандартный раствор N 1, готовят градуировочные растворы в хлороформе:
N 2 - 25 мкг/мл,
N 3 - 50 мкг/мл,
N 4- 100 мкг/мл,
N 5 - 200 мкг/мл,
N 6 - 250 мкг/мл.
Растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 1 месяца при условиях, исключающих испарение растворителя.
Способ приготовления градуировочных растворов из стандартного раствора N 1 представлен в таблице 1.
Таблица 1
| Номер | Стандартный раствор N 1 | Растворит. | Концентрация |
| 2 | 1,25 | 48,75 | 25,00 |
| 3 | 2,50 | 47,50 | 50,00 |
| 4 | 5,00 | 45,00 | 100,00 |
| 5 | 10,00 | 40,00 | 200,00 |
| 6 | 12,50 | 37,50 | 250,00 |
2.5.2. Подготовка колонки элюента
Для кондиционирования колонки через нее пропускают 6 мл элюента со скоростью 200 мкл/мин.
Для приготовления элюента смешивают гептан, метанол, изопропанол, хлороформ и уксусную кислоту (1:10 в изопропиловом спирте) в соотношении 60:5,5:3,5:1,5:0,1 по объему. Метанол перед употреблением сушат окисью бария (0,5 л метанола + 50 г окиси бария) и перегоняют.
2.6. Описание определения
Бумажный фильтр пинцетом вынимают из фильтродержателя, помещают в стакан, приливают на фильтр пипеткой вместимостью 10 мл смеси ацетон - хлороформ (1:1) так, чтобы фильтр полностью смачивался смесью. Экстракцию проводят 15 мин., периодически встряхивая стакан. Затем экстракт переливают в грушевидную колбу вместимостью 100 мл и экстракцию с фильтра повторяют. Экстракты объединяют и упаривают на водяной бане при 60 - 70 °C под вакуумом с использованием водоструйного насоса.
Сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа и 5 мкл полученного раствора вводят не менее 3-х раз с помощью дозирующего устройства в колонку хроматографа.
Проводят определение высоты пика и фиксируют среднюю из трех определений.
Условия хроматографирования
Длина колонки, см 6,3
Внутренний диаметр колонки, мм 2,0
Насадка колонки "Силасорб-600" зернением 5 мкм
Скорость потока элюента
через колонку, мкл/мин. 200
Скорость диаграммной ленты, мм/час 600
Диапазон чувствительности 0,4 - 0,8
Объем вводимой пробы, мкл 5
Объем удерживания, мкл 1200
Линейный диапазон определения, нг 10,0 - 100,00
Длина волны УФ-детектора, нм 226
Примечание: определение коэффициента извлечения проводилось после нанесения на фильтр дозированного количества анкора, которое рассчитывалось по формуле:
А внесено
Ки = ------------.
А обнаружено
Было показано, что извлечение проводится полностью без потерь.
2.7. Обработка результатов анализа
Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 25,00 мкг/мл проводят коррекцию градуировочного коэффициента, который рассчитывают по формуле:
Q
K = -,
h
где:
Q - масса анкора, введенная в хроматограф, нг;
h - высота пика, мм.
Расчет содержания анализируемого вещества проводится по формуле:
K x h x в x 10
X = --------------,
а x V
ст
где:
X - содержание анкора, мг/куб. м;
K - градуировочный коэффициент;
h - высота пика анкора, измеренная при анализе пробы воздуха, мм;
а - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
в - объем экстракта, мл;
V - объем воздуха, взятого для анализа, приведенный к стандартным
ст
условиям по ГОСТ 12.1.005-76 (при 20 °C и атм. давлении 101 кПа - 760 мм
рт. ст.), л.
V определяется по формуле:
ст
V x 293 x P
t
V = -----------------,
ст (273 + t) x 101,3
где:
V - объем воздуха, взятый для анализа при температуре t в месте отбора
t
пробы, л;
Р - атмосферное давление, кПа;
t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
3. Требования безопасности
При проведении анализов необходимо выполнять Правила техники безопасности при работе со стеклом, электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической лаборатории.