Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6070-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИЗАТРИНА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
O C H O .
H C-C=CH───┤\ ││ 22 26 3
3 │ │ \_C _O_CH ─┬┬─┬┐ _____
CH H C-│ / 2 ││││_CH _// \\ М.м. 338,4.
3 3 │/ \ / 2 \ ___ /
CH O ---
3
Изатрин (ресметрин, бензилфурон).
Действующее начало препарата - (+)-цис,транс(2-бензилфурил-4-метил)хризантемат. Полностью растворяется в 10% спирте этиловом с образованием бесцветной жидкости.
Внешний вид: воскоподобная масса, соломенно-желтого цвета, с резким запахом. Т. пл. 43 - 46 °C, Т. кип. 180 °C. Легко гидролизуется при действии кислот и щелочей. Препарат эффективен в малых дозировках (0,0025 - 0,01% действующего начала) в борьбе с широким рядом вредителей - инсектицид контактного действия.
ЛД для белых крыс при внутрижелудочном введении равна 840
50
мг/кг, при ингаляционном - 3650 мг/куб. м.
2. Методика определения
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции изатрина органическим растворителем, очистке экстракта и последующем хроматографировании.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Диапазон определяемых концентраций - 0,02 - 0,4% мг/кг.
Предел обнаружения - 1 мкг.
Число параллельных определений - 5.
_
Среднее значение определения (x) - 87%.
Стандартное отклонение (S, %) - +/- 8,5%.
Доверительный интервал определения при p = 0,95 и n = 5 87 +/- 10,5%.
2.2. Реактивы и материалы
Изатрин хч.
Бензол хч, ГОСТ 5955-81.
Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.
Фосфорно-молибденовая кислота, ТУ 6-09-3540-78, 5% водный раствор.
Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.
Систему подвижных растворителей готовят за 20 минут до хроматографирования: гексан - бензол в соотношении 1:1.
Стандартный раствор изатрина в хлороформе, содержащий 100 мкг/мл, готовили в мерной колбе из рабочего раствора.
Рабочий раствор готовят следующим образом: в мерную колбу (25 или 50 мл) со шлифом наливают 10 - 15 мл хлороформа, взвешивают, добавляют 1 - 2 капли изатрина, взвешивают и доводят объем до метки. По разнице весов между вторым и первым взвешиванием находят навеску пестицида, рассчитывают концентрацию его. Рабочие и стандартные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в темном и прохладном месте.
2.3. Приборы и посуда
Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР).
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Аппарат для встряхивания, ТУ 25-11-917-79.
Посуда лабораторная, ГОСТ 25336-82.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.
Сушильный шкаф.
2.4. Отбор, хранение и доставка проб
2.4.1. Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, от 21.08.1979, за N 2051-79.
2.5. Проведение определения
Навеску 25 - 40 г измельченного растительного материала помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 80 мл смеси ацетон - вода в соотношении 1:1 по объему. Экстрагирование проводят встряхиванием в течение 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр. Экстракцию повторяют еще два раза. Объединяют экстракты и переносят в делительную воронку. Прибавляют 200 мл дистиллированной воды, перемешивают и реэкстрагируют изатрин дважды по 30 мл гексаном. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.
2.5.1. Условия хроматографирования
Сконцентрированную пробу количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицида, содержащие 1, 2, 5, 10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными растворами помещают в
хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до
хроматографирования залита смесь бензол - гексан (1:1 по объему).
После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку
вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения
подвижного растворителя. После этого пластинку обрабатывают из
пульверизатора раствором фосфорно-молибденовой кислоты и нагревают
в сушильном шкафу при температуре 60 °C в течение 5 - 7 минут.
Препарат проявляется в виде пятен синего цвета на желтом фоне.
Величина R = 0,36 +/- 0,05.
f
2.6. Обработка результатов анализа
Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора.
Измерение площади проводится с помощью миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график зависимости препарата в мкг от площади пятен. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пробе соблюдается в интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть пробы (0,1 - 0,2 мл) параллельной пробы. Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:
A x S
2
X = ------,
P x S
1
где:
X - содержание изатрина в анализируемой пробе;
A - содержание препарата в стандартном растворе, мг/кг;
S - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
1
S - площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - вес пробы, взятой на анализ, г.
3. Требования безопасности
Соблюдать все требования безопасности, рекомендованные для работы с летучими органическими растворителями и со среднетоксичными пестицидами.