Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Геноцид собственного народа или зеленская чума 21 века 2024-04-27
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
Картинка недели
Прочие СССР 1917-1992
Категории
Сахар. Методы микробиологического анализа. ГОСТ 26968-86 утв. Постановлением Госстандарта СССР от 01.08.1986 N 2321
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 793
Материал приурочен к дате: 1986-08-01
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1986-08-01 Материалы за: Год 1986
Автор: Мета Гость
Утвержден
Постановлением
Государственного комитета СССР
по стандартам
от 1 августа 1986 г. N 2321
Дата введения -
1 июля 1987 года
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
САХАР
МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
SUGAR.
METHODS OF MICROBIOLOGICAL ANALYSIS
ГОСТ 26968-86
(с Изменением N 1, утв. в апреле 1995 г. (ИУС 7-95))
Постановлением Государственного комитета по стандартам от 1 августа 1986 г. N 2321 дата введения установлена с 01.07.1987.
Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93).
Переиздание с Изменением N 1, утвержденным в апреле 1995 г. (ИУС 7-95).
Настоящий стандарт распространяется на сахар-песок, сахар-рафинад, рафинированный сахар-песок и жидкий сахар и устанавливает методы определения общего количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, количества дрожжей и плесневых грибов.
Методы основаны на высеве определенного количества раствора сахара в агаризованную питательную среду, выращивании посевов, подсчете всех выросших видимых колоний, а для дрожжей и плесневых грибов - колоний, типичных по макро- или микроскопической морфологии, и определении микроорганизмов в 1 г сахара.
(Измененная редакция, Изм. N 1)
1. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ
1.1. Отбор проб сахара для микробиологического анализа проводят по ГОСТ 12569-85 и ГОСТ 26668-85.
Пробы от продуктов отбирают асептическим способом, исключающим микробное загрязнение продукта из окружающей среды.
При отборе проб жидкого сахара из резервуара, оснащенного краном, кран сначала промывают, вытирают ватой, пропитанной этиловым спиртом, и обжигают в пламени. Затем выпускают до 500 куб. см жидкого сахара (в зависимости от вместимости резервуара и диаметра крана) и только после этого отбирают пробы в посуду, заполняя 3/4 ее объема.
Широкогорлую посуду закрывают ватными пробками, сверху пробки накладывают чистую бумагу и плотно прижимают ее к горлу посуды. Банки закрывают крышками, предварительно обработанными этиловым спиртом, маркируют этикетками с указанием номера резервуара и крана, даты отбора проб и доставляют на анализ.
1.2. Пробы отбирают стерильным пробоотборником в стерильную посуду (банки, полиэтиленовые пакеты).
Посуду, инструменты и материалы, соприкасающиеся с продуктами во время отбора проб, предварительно стерилизуют одним из следующих способов:
насыщенным паром в стерилизаторе при температуре (121 +/- 2) °C 30 мин.;
горячим воздухом в стерилизаторе: с принудительной циркуляцией воздуха при температуре 170 - 175 °C в течение 60 мин.;
без принудительной циркуляции воздуха при температуре 180 - 185 °C в течение 15 мин., при температуре 165 - 170 °C в течение 120 мин.
Допускается инструменты обрабатывать погружением в этиловый спирт с последующим обжиганием.
1.3. Отобранные пробы, предназначенные для анализа вне предприятия-изготовителя, пломбируют и опечатывают печатью организации, отвечающей за контролируемую продукцию, и транспортируют в лабораторию. Пробы снабжают актом отбора проб, в котором указывают наименования продукта, предприятия-изготовителя, номер партии, дату отбора проб, цель микробиологического анализа, подписи лиц, отбиравших пробу. Время перевозки до 12 ч с момента отбора проб.
Отбор, транспортирование в лабораторию и вскрытие проб проводят в условиях, исключающих вторичную микробиальную обсемененность сахара, в соответствии с методами, утвержденными в установленном порядке.
(1.1 - 1.3. Измененная редакция, Изм. N 1)
1.4. Анализ проводят сразу же после доставки сахара в лабораторию.
1.5. Перед вскрытием полиэтиленового пакета с сахаром его перемешивают 10-кратным переворачиванием или круговым движением.
Пробы сахара в полиэтиленовых пакетах вскрывают на столе, предварительно обработанном раствором этилового спирта.
Полиэтиленовые пакеты вскрывают стерильными ножницами, скальпелем или другим инструментом в месте, предварительно обработанном тампоном, смоченным раствором этилового спирта, горлышко банки до и после вскрытия обжигают в пламени спиртовой горелки.
1.6. После вскрытия пакета или банки с сахаром содержимое перемешивают, стерильными ложкой или шпателем отбирают навеску и переносят ее в предварительно взвешенную стерильную посуду.
Навески сахара отбирают немедленно после вскрытия упаковки, в непосредственной близости от огня.
(1.5, 1.6. Измененная редакция, Изм. N 1)
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ
2.1. Для проведения анализа используют следующие аппаратуру, материалы и реактивы:
микроскоп;
термостат;
шкаф сушильный с терморегулятором, обеспечивающим нагрев до 190 °C;
баню водяную;
весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104-88;
рефрактометр;
pH-метр;
колбы 2-100-2 по ГОСТ 1770-74 и колбы Кн-2-250-34 ТС и Кн-2-1000-42 ТС по ГОСТ 25336-82;
палочки стеклянные;
пипетки вместимостью 1, 2 или 5 куб. см;
пробирки П1-16-150 ХС по ГОСТ 25336-82;
стекла покровные по ГОСТ 6672-75;
стекла предметные по ГОСТ 9284-75;
термометры стеклянные ртутные от 0 до 50 °C и от 50 до 100 °C по ГОСТ 28498-90 и нормативным документам;
цилиндры 1(3)-100 по ГОСТ 1770-74;
чашки ЦБН-2 (Петри) по ГОСТ 25336-82;
бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-76;
вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556-81;
марлю медицинскую по ГОСТ 9412-93;
лупу складную карманную по ГОСТ 25706-83;
ножи и скальпели медицинские по ГОСТ 21240-89;
пинцеты по ГОСТ 21241-89;
спиртовку по ГОСТ 25336-82 или газовую горелку;
мясо-пептонный бульон (МПБ);
агар микробиологический по ГОСТ 17206-96;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;
спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67;
спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87;
сусло солодовое неохмеленное;
кислоту лимонную по ГОСТ 908-79, раствор с массовой долей 20%; готовят следующим образом: 20 г лимонной кислоты переносят в мерную колбу, доводят объем водой до 100 куб. см, разливают в пробирки или колбы и стерилизуют при температуре (121 +/- 1) °C в течение 20 мин.;
пробоотборник или щуп из нержавеющей стали;
чашка нейзильберовая вместимостью 150 куб. см.
Допускается применение другой аппаратуры, лабораторной посуды с метрологическими и техническими характеристиками не ниже установленных в настоящем стандарте.
(Измененная редакция, Изм. N 1)
3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
3.1. Подготовка посуды и материалов
3.1.1. Посуду, предназначенную для микробиологического анализа, моют, а новую - дополнительно кипятят в подкисленной воде (раствор соляной кислоты массовой долей 1 - 2%) в течение 15 мин., затем ополаскивают дистиллированной водой и стерилизуют.
Посуду стерилизуют в сушильном шкафу при температуре 170 °C в течение 2 ч или в стерилизаторе при температуре (121 +/- 2) °C в течение 30 мин. с последующим подсушиванием.
Чашки Петри, пипетки стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах. В конец пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в стерилизаторе, завернутыми в бумагу.
Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах.
(3.1, 3.1.1. Измененная редакция, Изм. N 1)
3.2. Приготовление питательных сред
3.2.1. Приготовление мясо-пептонного агара
К 1000 куб. см мясо-пептонного бульона прибавляют 20 г агара, нагревают на водяной бане до растворения, фильтруют через вату, разливают в колбы и стерилизуют при температуре (121 +/- 1) °C в течение 15 мин.
3.2.2. Приготовление солодового сусло-агара
1000 куб. см неохмеленного солодового сусла, разбавленного питьевой водой до массовой доли сухих веществ 8 - 10%, фильтруют через вату, прибавляют 20 г агара, нагревают на водяной бане до расплавления агара, затем разливают в стерильные колбочки и стерилизуют 15 мин. при температуре (115 +/- 1) °C.
Среду охлаждают до (45 - 55) °C и устанавливают pH 3,6 +/- 0,1, добавляя 2 - 3 куб. см раствора лимонной кислоты с массовой долей 20%. Готовую среду хранят в холодильнике при температуре (4 +/- 1) °C не более 7 сут. Если по истечении 7 сут. среда остается стерильной, то допускается хранение ее в течение 1 мес.
3.3. Проведение серии десятикратных разведений
В нейзильберовой чашке, предварительно обработанной этиловым спиртом и обожженной над спиртовкой, взвешивают 10 г сахара, записывая результат взвешивания до второго десятичного знака.
Навеску переносят в плоскодонную колбу с 90 куб. см стерильной воды, взбалтывают до полного растворения и получают первое (исходное) разведение.
Второе разведение готовят из одной части первого разведения и девяти частей стерильной воды путем смешивания в стерильной колбе или пробирке.
Разведения готовят до такой степени, чтобы можно было определить предполагаемое количество микроорганизмов в 1 г сахара.
При приготовлении разведений растворы перемешивают стерильной пипеткой путем десятикратного насасывания и выдувания из нее содержимого.
Интервал между приготовлением навесок или их разбавлений и высевом в питательные среды не должен превышать 30 мин.
(Измененная редакция, Изм. N 1)
4. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
4.1. Метод определения общего количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов
4.1.1. Из разведений, приготовленных по п. 3.3, стерильной пипеткой отбирают по 1 или 2 куб. см исследуемого раствора сахара и высевают параллельно в две чашки Петри для каждого разведения. При посеве крышку чашки Петри слегка приоткрывают и посевной материал вносят на дно чашки.
В каждую чашку Петри не позднее чем через 15 мин. добавляют 15 - 20 куб. см питательной среды (мясо-пептонного агара). Чашки осторожно вращают круговыми движениями, чтобы посевной материал равномерно распределился по всей питательной среде, и оставляют в горизонтальном положении до полного застывания. После застывания среды чашки помещают в термостат вверх дном на (72 +/- 3) ч при температуре (30 +/- 1) °C.
4.2. Метод определения количества дрожжей и плесневых грибов
Из разведений, приготовленных по п. 3.3, стерильной пипеткой отбирают по 1 или 2 куб. см исследуемого раствора сахара и высевают параллельно в две чашки Петри для каждого разведения. При посеве крышку чашки Петри слегка приоткрывают и посевной материал вносят на дно чашки. Пробу заливают 15 - 20 куб. см питательной среды (солодовое сусло-агар). Чашки осторожно вращают круговыми движениями, чтобы посевной материал равномерно распределился по всей питательной среде, и оставляют в горизонтальном положении до полного застывания. После застывания среды чашки помещают в термостат вверх дном на 120 ч при температуре 24 - 30 °C.
4.3. Бактерии группы кишечных палочек и патогенных микроорганизмов определяют по методам, утвержденным органами государственного санитарно-эпидемиологического надзора.
(4.2, 4.3. Измененная редакция, Изм. N 1)
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. После термостатирования через 24 ч для мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов и через 72 ч для дрожжей и плесневых грибов проводят предварительный подсчет колоний.
5.2. Окончательный подсчет колоний проводят через (72 +/- 3) ч для мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов и через 120 ч для дрожжей и плесневых грибов.
При окончательном подсчете дрожжевых колоний допускается их микроскопировать.
Если колоний немного, количество определяют визуально; если много, то подсчет ведут на 1/4 или 1/8 площади чашки при помощи лупы, делая затем пересчет на всю чашку и на количество засеянного сахара.
Колонии микроорганизмов подсчитывают в каждом из параллельных посевов одного разведения. По результатам подсчета вычисляют среднее арифметическое значение количества колоний во всех посевах одного разведения.
Если имеются колонии, выросшие не из одного, а из следующих друг за другом разведений, то подсчитывают количество микроорганизмов в сахаре по результатам подсчета колоний в каждом из этих разведений раздельно и вычисляют среднее арифметическое значение.
Количество микроорганизмов в 1 г сахара (X) вычисляют по формуле:
n
a x 10
X = -------,
V
где: a - среднее арифметическое значение количества микроорганизмов в одном разведении;
n - степень разведения продукта;
V - объем посевного материала, внесенного в чашку, куб. см.
Полученные результаты округляют:
до числа, кратного 5 - если среднее арифметическое значение количества микроорганизмов менее 100 (например, 71 до 75; 83 до 85);
до числа, кратного 20 - если среднее арифметическое значение количества микроорганизмов более 100 и оканчивается цифрой 5 (например, 115 до 120; 125 до 140);
до числа, кратного 10 - если среднее арифметическое значение количества микроорганизмов более 100 и не оканчивается цифрой 5 (например, 116 до 110; 111 до 110; 121 до 120).
Результат вычислений выражают числом от 1,0 до 9,9,
n
умноженным на 10 , где n - соответствующая степень разведения
продукта.
2 3
Пример: 75 - 0,75 x 10 ; 1110 - 1,11 x 10 .
Остальные материалы раздела: Прочие СССР 1917-1992
Предыдущая Временное наставление по аэрозольной иммунизации свиней против классической чумы утв. Госагропромом СССР 30.07.1986Следующая Вирусологическое исследование отдельных экземпляров иксодовых клещей с использованием методов микроанализа. Методические рекомендации