Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
27 апреля 1984 г. N 3022-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО СИСТЕМАТИЧЕСКОМУ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ АНАЛИЗУ
МИКРОКОЛИЧЕСТВ ГЕРБИЦИДОВ РАЗЛИЧНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ
ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ПРОБАХ ВОДЫ, ПОЧВЫ И РАСТЕНИЯХ
1. Характеристика анализируемых гербицидов
2,4-Дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-Д)
Структурная формула (не приводится).
C H O Cl Мол. м. 221,04.
8 6 8 2
Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 141 °C. Ткип. = 160 °C при 0,4 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,5 г/л. Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей.
Применяется для борьбы с двудольными сорняками на посевах зерновых культур.
Препарат среднетоксичен. ЛД = 875 мг/кг.
50
МДУ в пищевых продуктах не допускается, в кормах для молочного скота и птицы - 0,1 мг/кг, для откормочных животных и птицы - 0,6 мг/кг. ПДК в воде - 0,2 мг/л.
2-Метокси-3,6-дихлорбензойная кислота (дикамба, банвел Д)
Структурная формула (не приводится).
C H O Cl Мол. м. 221,04.
8 6 8 2
Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 114 - 116 °C. Растворимость в
воде - 1,5 г/л. Хорошо растворяется в большинстве органических
растворителей.
Препарат малотоксичен. ЛД = 1100 мг/кг.
50
ПДК в почве - 0,25 мг/кг.
3-Метоксикарбамидофенил-N-(3'-метилфенил)-карбамат (бетанал,
фенмедифам)
Структурная формула (не приводится).
C H O N Мол. м. 300,32.
16 16 4 2
Порошок белого цвета. Тпл. = 143 - 144 °C. Плохо растворяется в воде - менее 0,01 г/л. Хорошо растворяется в этиловом спирте, ацетоне, циклогексаноне.
Используется для борьбы с сорной растительностью при повсходовом применении на посевах сахарной и столовой свеклы.
Малотоксичен. ЛД = 5000 - 8000 мг/кг.
50
МДУ в свекле - 0,2 мг/кг. ПДК в воде - 0,5 мг/л.
N-(3,4-Дихлорфенил)-N'-метокси-N'-метилмочевина (линурон)
Структурная формула (не приводится).
C H O N Cl Мол. м. 249,10.
9 10 2 2 2
Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 93 - 95 °C. Растворимость в воде
- 75 мг/л. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.
Применяется в виде смачивающегося порошка с содержанием д.в. - 80%.
Малотоксичен. ЛД = 1500 мг/кг.
50
МДУ в картофеле, бобовых, кукурузе - 0,1 мг/кг, моркови - 0,05 мг/кг. ПДК в воде водоемов санитарно-бытового водопользования - 1,0 мг/л, для условий сельского хозяйства - 0,02 мг/л. ПДК в почве - 1,0 мг/кг.
S-Этил-N,N-дипропилтиокарбамат (эптам)
C H
/ 3 7
C H -S-C -N
2 3 ││ \
O C H
3 7
C H OSN Мол. м. 189,82.
9 19
Бесцветная или слегка желтоватая жидкость. Уд. масса - 0,966. Плохо растворим в воде - 0,4 г/л. Смешивается с большинством органических растворителей. Ткип. = 120 °C при 10 мм рт. ст. Давление пара - 0,15 мм рт. ст. при 25 °C.
Применяется для борьбы с сорняками на посевах различных сельскохозяйственных культур.
Малотоксичен. ЛД = 1600 - 3000 мг/кг.
50
МДУ в свекле - 0,05 мг/кг. ПДК в воде - 0,1 мг/л.
S-Пропил-N-этил-N-бутилтиокарбамат (тиллам)
C H
/ 2 3
C H -S-C -N
3 7 ││ \
O C H
4 9
C H OSN Мол. м. 205,35.
10 22
Жидкость желтого цвета с золотистым оттенком. Уд. вес = 0,956. Ткип. = 142,5 °C при 20 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,06 г/л. Смешивается со многими органическими растворителями. Давление пара - 0,085 мм рт. ст. при 25 °C.
Используется для борьбы с сорной растительностью на посевах табака, сахарной свеклы, конопли, томатов.
Малотоксичен. ЛД = 1120 мг/кг.
50
МДУ в овощах, томатах, сахарной и столовой свекле - 0,05 мг/кг. ОДК в
почве - 0,6 мг/кг. ПДК в воде - 0,01 мг/л.
S,N-Диэтил-N-циклогексилтиокарбамат (ронит)
O
-- ││
/ \-N-C -S-C H
\ / │ 2 5
-- C H
2 5
C H OSN Мол. м. 215,36.
11 21
Слегка желтоватая жидкость. Уд. масса = 0,970. Ткип. = 145 - 146 °C при 10 мм рт. ст. Растворимость в воде - 0,1 г/л. Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей. Давление пара - 0,002 мм рт. ст. при 25 °C.
Гербицид, применяющийся на посевах сахарной свеклы, шпината.
Малотоксичен. ЛД = 3600 мг/кг.
50
МДУ в сахарной свекле и столовой свекле - 0,3 мг/кг.
2-Хлор-4,6-диэтиламино-симм-триазин (симазин)
Cl
│
N// \N
│ ││
/ \\ /\
C H -NH N NH-C H
2 5 2 5
C H N Cl Мол. м. 201,66.
7 12 5
Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 225 - 227 °C. Плохо растворим в
воде и органических растворителях.
Применяется препаративная форма с содержанием д.в. 50%.
Малотоксичен. ЛД = 5000 мг/кг.
50
МДУ в фруктах - 0,2 мг/кг, винограде - 0,05 мг/кг, зерновых - 1,0
мг/кг. ПДК в воде - отсутствие.
2-Хлор-4-этиламино-6-изопропиламино-симм-триазин (атразин)
Cl
│
N// \N
│ ││ CH
/ \\ /\ / 3
C H -NH N NH-CH
2 5 \
CH
3
C H N Cl Мол. м. 215,69.
8 14 5
Бесцветный кристаллический порошок. Тпл. = 173 - 175 °C. Плохо
растворим в воде.
Гербицид. Выпускается в виде смачивающегося порошка (50% д.в.).
Малотоксичен. ЛД = 3080 мг/кг.
50
МДУ в зерновых, фруктах, овощах - 0,1 мг/кг. ПДК в воде - 0,5 мг/л.
2-Метилтио-4,6-диизопропиламино-симм-триазин (прометрин)
SCH
│ 3
N// \N
CH │ ││ CH
3\ / \\ /\ / 3
CH-NH N NH-CH
/ \
CH CH
3 3
C H N S Мол. м. 241,36.
10 19 5
Белое кристаллическое вещество. Тпл. = 118 - 120 °C. Растворимость в
воде - 0,05 г/л. Хорошо растворим в органических растворителях.
Гербицид, применяющийся на посевах гороха и др. культур.
Малотоксичен. ЛД = 3150 - 3750 мг/кг.
50
МДУ в овощах и картофеле - 0,1 мг/кг. ПДК в почве - 0,5 мг/кг. ПДК в
воде - 3,0 мг/л.
2,6-Динитро-4-трифторметил-N,N-дипропиланилин (трефлан, нитран)
Структурная формула (не приводится).
C H N O F Мол. м. 335,38.
9 16 3 4 3
Желто-оранжевые кристаллы. Тпл. = 48,5 - 49 °C. Ткип. = 139 - 140 °C.
Растворимость в воде менее 1 мг/л. Хорошо растворяется во многих
-4
органических растворителях. Давление пара - 1,99 x 10 мм рт. ст. (29 °C).
Применяется как гербицид для довсходового внесения на посевах табака,
гороха и др.
Малотоксичен. ЛД = 10 г/кг.
50
МДУ в луке, моркови, капусте - 0,5 мг/кг. ПДК в воде - 1,0 мг/л.
1-Фенил-4-амино-5-хлор-пиридазон-6 (пирамин, феназон)
Структурная формула (не приводится).
C H N OCl Мол. м. 221,65.
10 8 3
Белый кристаллический порошок. Тпл. = 205 - 206 °C. Растворимость в
воде - 0,004 г/л. Хорошо растворим в ацетоне, метаноле.
Выпускается в виде 80% смачивающегося порошка.
Малотоксичен. ЛД = 3500 мг/кг.
50
ОДК в почве - 0,7 мг/кг. ПДК в воде - 2,0 мг/л.
2. Основные положения
2.1. Принцип метода
Методика основана на газохроматическом определении гербицидов или их модифицированных производных с помощью детекторов постоянной скорости рекомбинации и термоионного после выделения их образцов ацетоном и очистки экстракта перераспределением в системах двух несмешивающихся жидкостей. При очистке производится одновременное разделение препаратов на группы, в которых отсутствуют соединения, имеющие близкие хроматографические характеристики. Для гербицидов, способных перегоняться с водяным паром, предусмотрен метод очистки этим способом от сопутствующих примесей. Уровень допустимых остаточных количеств достигается способами химического модифицирования: метилирования свободных карбоновых кислот и бромирования ароматических аминов, выделяющихся в результате щелочного гидролиза фениламидов.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ МЕТОДИКИ И СТАТИСТИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ
┌───────────┬────────────────────────────────┬────────────────────────────┐
│Препараты │ Предел обнаружения, │ % определения стандартных │
│ │ мг/кг, мг/л, мл/кг │ количеств при n = 5 │
│ ├─────────┬─────────┬────────────┤ │
│ │ почва │ вода │ растения │ │
├───────────┼─────────┼─────────┼────────────┼────────────────────────────┤
│2,4-Д │0,01 │0,01 │0,04 │79,0 +/- 3,4 │
│Дикамба │0,01 │0,01 │0,04 │85,8 +/- 2,6 │
│Бетанал │0,005 │0,005 │0,02 │65,2 +/- 4,7 │
│Линурон │0,005 │0,005 │0,02 │69,4 +/- 6,2 │
│Эптам │0,05 │0,05 │0,2 │97,4 +/- 5,9 │
│Тиллам │0,05 │0,05 │0,2 │88,0 +/- 3,5 │
│Ронит │0,05 │0,05 │0,2 │91,4 +/- 6,4 │
│Атразин │0,05 │0,05 │0,2 │94,0 +/- 3,3 │
│Прометрин │0,05 │0,05 │0,2 │92,1 +/- 2,1 │
│Симазин │0,05 │0,05 │0,2 │71,9 +/- 4,0 │
│Трефлан │0,01 │0,01 │0,04 │82,6 +/- 6,7 │
│Пирамин │0,005 │0,005 │0,02 │80,8 +/- 7,9 │
└───────────┴─────────┴─────────┴────────────┴────────────────────────────┘
2.2. Реактивы и материалы
Стандартные растворы гербицидов в ацетоне (10 - 100 мкг/мл).
Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетон чда, ГОСТ 2603-79.
Этилацетат чда, ГОСТ 22300-76.
Натрия гидроокись хч, ГОСТ 4828-77.
Раствор натрия гидроокиси 1 н и 10 н водный.
Кислота соляная хч, ТУ 62-09-2437-72.
Раствор соляной кислоты 1 н водный.
Натрий сернокислый безводный хч, ГОСТ 6058-77.
Реактивы для метилирования:
Гидразид-гидрат чда.
Метанол хч, ГОСТ 6995-77.
Калия гидроокись ч, ГОСТ 9285-78.
Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.
Эфир диэтиловый хч, ГОСТ 6262-79.
Реактивы для щелочного гидролиза:
Этиленгликоль ч, ГОСТ 10164-75.
Этиловый спирт - ректификат, ТУ 6-09-1710-72.
Калия гидроокись ч, ГОСТ 9285-78.
Реактивы для бромирования:
Кислота серная хч, ГОСТ 4204-77.
Калия бромид хч, ГОСТ 4160-74.
Калия бромат хч, ГОСТ 4457-74.
2,4,6-Траметиланилин (мезидин) ч, фирма "Fluka AG", Швейцария.
Натрий сернокислый безводный ч, ТУ 6-09-4059-75.
Толуол чда, ГОСТ 5789-78.
Раствор серной кислоты, 1 н водный.
Раствор бромида калия 20% в 1 н растворе серной кислоты.
Раствор бромата калия 1% водный, хранить в темной посуде на холоде.
Раствор мезидина 0,2% в 1 н растворе серной кислоты, хранить в темной посуде на холоде.
Газы и неподвижные фазы для хроматографии:
Азот особой чистоты или аргон высшего сорта.
Водород.
Воздух сжатый.
5% силиконовой фазы SE-30, нанесенной на Хроматон N-AW DMCS (0,16 - 0,20 мм).
5% силиконовой фазы XE-60, нанесенной на Хроматон N-AW DMCS (0,16 - 0,20 мм).
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Газовый хроматограф "Цвет-106"или аналогичный, оснащенный детекторами термоионным и постоянной скорости рекомбинации (электронозахватным) и настроенный на работу двух детекторов одновременно. В линию термоионного детектора подключается стеклянная колонка (1 м x 3 мм), содержащая 5% SE-30, а в линию детектора постоянной скорости рекомбинации - стеклянная колонка (2 м x 3 мм) с 5% XE-60.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный.
Прибор для получения диазометана (рис. 2 - не приводится).
Масляная баня с регулятором температуры от 150 до 200 °C.
В Методике используется стандартная химическая посуда, выпускаемая отечественной промышленностью.
2.4. Подготовка к определению
Стандартные растворы гербицидов приготавливаются обычным способом и могут храниться на холоде в темных склянках в течение 1 месяца. Годность стандартных растворов к применению проверяется хроматографическим путем сравнения с хроматограммами полученных ранее свежеприготовленных растворов. Для каждого стандартного раствора определяется калибровочный коэффициент, который используется и для количественных расчетов (см. раздел 2.7).
Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия безводный прокалить.
Хроматографические колонки и детекторы кондиционируются перед началом работы не менее 1 часа.
Получение диазометанав реакционную колбу прибора (рис. 2) помещают 6 г калия гидроокиси, 3 мл метанола и 3 мл гидразин-гидрата. В приемную колбу наливают 30 мл диэтилового эфира. Из капельницы подается хлороформ со скоростью 1 капля за 1 - 2 сек. Окончание реакции получения диазометана определяется по выделению белых паров в реакционной колбе или по появлению бурой окраски реакционной смеси. Эфирный раствор диазометана интенсивного желтого цвета предпочтительно применять свежеполученным, но можно хранить 3 - 5 дней в темной склянке на холоде.
Приготовление щелочного этиленгликоля: 1 г калия гидроокиси растворяется в 1 мл смеси этанол - вода (1:1) и объем доводится до 25 мл этиленгликолем.
Проверка раствора мезидина на чистоту: мезидин очищается от примесей, мешающих определению, хроматографированием на колонке (10 см x 0,5 мм), содержащей 5 см основной окиси алюминия. Мезидин в количестве 10 мл пропускают через колонку и отбирают первые 5 мл элюата.
К 10 мл 0,2% раствора мезидина в 1 н водном растворе серной кислоты прибавляются 1 мл 20% раствора бромида калия и 1 мл 1% раствора бромата калия. Смесь помещается на 15 мин. в темное место. Избыток брома после бромирования удаляется небольшими порциями сульфата натрия, реакционная смесь подщелачивается 15 мл 10 н раствора едкого натра и экстрагируется 5 мл толуола. При хроматографировании 5 мкг толуольного слоя не должно быть пиков, имеющих близкие параметры удерживания с бромпроизводными анилина, триметиланилина и 3,4-дихлоранилина.
Условия хроматографического разделения гербицидов
Расход газа-носителя через колонку в линии ДПР - 60 мл/мин., а в линии ТИД - 30 мл/мин. На поддувку ДПР расход газа составляет 160 мл/мин. Расход водорода для ТИД - 15 мл/мин., воздуха - 300 мл/мин.
Для хроматографического разделения гербицидов необходимы два температурных режима:
а) температура испарителя - 230 °C, термостата колонок - 190 °C, термостата детекторов - 230 °C.
В этих условиях времена удерживания гербицидов (или их производных) составляют при анализе с помощью ТИД: атразин - 3,1 мин., симазин - 3,1 мин., прометрин - 5,4 мин.; при анализе с помощью ДПР: метиловый эфир 2,4-Д - 4,1 мин., метиловый эфир дикамбы - 2,1 мин., 2,4,6-трибром-3-метиланилин (бетанал) - 4,0 мин., 2,6-дибром-3,4-дихлоранилин (линурон) - 4,0 мин., 2,4,6-трибром-анилин (пирамин) - 3,0 мин., трефлан - 3,7 мин.;
б) температура испарения - 190 °C, термостата колонок - 140 °C.
Этот режим используется при анализе тиокарбаматов с помощью ТИД. Времена удерживания гербицидов: эптам - 3,2 мин., тиллам - 5,2 мин., ронит - 11,4 мин.
2.5. Отбор проб
Отбор проб для анализа производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", N 2051-79 от 21.08.79.
Для анализа отбирают навески средних проб в количествах: 100 мл воды, 100 г почвы известной влажности и 25 г свежесобранной зеленой массы.
2.6. Проведение определения
На рис. 1 приведена блок-схема хода аналитического определения микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии в пробе.
┌──────────┐ ┌──────────┐ ┌──────────┐ ┌────────┐
│Кипячение │──>│Ацетоновый│──>│Щелочно- │<──┤1 н NaOH│
│с ацетоном│ │ экстракт │ │ацетоновый│ └────────┘
└──────────┘ └──────────┘ │ раствор │
└───┬──────┘
Перераспределение │
с н-гексаном ---->│
│
┌───────────────┐ │ ┌───────────────────────┐
│Гексановый слой│<───────┴────>│Щелочно-ацетоновый слой│
└─────────┬─────┘ └────────────────┬──────┘
Перераспределение │ Перераспределение │
с 1 н HCl ---->│ с этилацетатом ------->│
/ │
┌──────────┐ / ┌──────────┐ ┌─────────────┐ \/ ┌──────────┐
│Гексановый│ \/ │Солянокис-│ │Этилацетатный│<---->│Щелочно- │
│ слой │<----->│лый слой │ │ слой │ │ацетоновый│
└────┬─────┘ └────┬─────┘ └──────┬──────┘ │слой │
\/ \/ \/ └────┬─────┘
┌──────────┐ ┌─────────────┐ ┌─────────────┐ \/
│Концентри-│ │Доводка pH до│ │Концентриро- │ ┌────────────┐
│рование │ │10 - 12 с 1 н│ │вание │ │ Доводка pH │
└────┬─────┘ │ NaOH │ └──────┬──────┘ │до 1 с конц.│
│ └───────┬─────┘ \/ │ HCl │
\/ │ ┌────────────┐ └─┬──────────┘
┌────────────┐ │<-Перерас- │ ТИД │ │<──┐
│Дистилляция │ │ пределение │ (симазин) │ │Перерас-
│с водяным │ │ с гексаном └─────┬──────┘ │пределение
│ паром, │ \/ \/ │с этилацетатом
│экстракция │ ┌──────────┐ ┌────────────┐ │
│ гексаном │ │Гексановый│ │ Гидролиз │ │
└────┬───────┘ │ слой │ └─────┬──────┘ \/
\/ └─────┬────┘ \/ ┌────────────────┐
┌──────────┐ \/ ┌────────────┐ │ Этилацетатный │
│Гексановый│ ┌──────────┐ │Бромирование│ │ слой │
│экстракт │ │Концентри-│ └─────┬──────┘ └───────┬────────┘
└────┬─────┘ │рование │ \/ \/
\/ └─────┬────┘ ┌────────────┐ ┌────────────────┐
┌──────────┐ \/ │ ДПР │ │Концентрирование│
│Концентри-│ ┌──────────┐ │ (бетанал, │ └───────┬────────┘
│рование │ │ ТИД │ │ пирамин) │ \/
└────┬─────┘ │(атразин, │ └────────────┘ ┌────────────────┐
\/ │прометрин)│ │ Метилирование │
┌──────────┐ └──────────┘ └───────┬────────┘
│ ТИД │ \/
│ (эптам, │ ┌────────────────┐
│тиллам, │ │ ДПР │
│ ронит) │ │(2,4-Д,дикамба) │
└─────┬────┘ └────────────────┘
\/
┌──────────┐
│ ДПР │
│(трефлан) │
└─────┬────┘
\/
┌──────────┐
│Гидролиз │
└─────┬────┘
\/
┌──────────┐
│Бромирова-│
│ние │
└─────┬────┘
\/
┌──────────┐
│ ДПР │
│(линурон) │
└──────────┘
Рис. 1. Блок-схема хода аналитического определения
микроколичеств гербицидов при их совместном присутствии
в одной пробе
2.6.1. Подготовка проб воды к определению
К 100 мл воды, отобранной для анализа, прибавляют 5 мл 10 н раствора едкого натра.
2.6.2. Выделение гербицидов из почвы и растений
Пробы почвы или растений заливают таким количеством ацетона, чтобы они были полностью покрыты растворителем, и помещают на водяную баню с температурой 70 - 75 °C. Колбы присоединяют к обратным холодильникам и выдерживают в этих условиях в течение 1 часа. После этого содержание колб охлаждается. Собирают отфильтрованный ацетоновый экстракт и упаривают его с помощью ротационного испарителя до объема 50 мл. К полученному остатку прибавляют 50 мл 1 н раствора едкого натра.
2.6.3. Очистка экстрактов и разделение гербицидов
Дальнейшее определение для проб воды, почвы и растительных проб проводится одинаково.
2.6.3.1. Отделение тиокарбаматов, трефлана, атразина, прометрина и линурона от прочих гербицидов
Щелочно-ацетоновый раствор экстрагируется в делительной воронке трижды по 30 мл н-гексана. Все порции гексана объединяют.
2.6.3.2. Отделение тиокарбаматов, трефлана и линурона от атразина и прометрина
Гексановый экстракт по пункту 2.6.3.1 экстрагируют тремя порциями по 25 мл 1 н раствора соляной кислоты. Солянокислые растворы объединяют.
2.6.3.3. Отделение бетанала, пирамина и симазина от 2,4-Д и дикамбы
К щелочно-ацетоновому экстракту после п. 2.6.3.1 прибавляют 100 мл 1 н раствора едкого натра и препараты экстрагируют трижды по 50 мл этилацетата. Фракции этилацетата объединяют.
2.6.3.4. Выделение 2,4-Д и дикамбы в виде свободных кислот
Щелочно-ацетоновый раствор после 2.6.3.3 подкисляют концентрированной соляной кислотой до pH = 1 и экстрагируют в делительной воронке тремя порциями по 50 мл этилацетата. Этилацетатные экстракты объединяют.
2.6.3.5. Выделение атразина и прометрина
Солянокислый экстракт после п. 2.6.3.2 подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 10 мл) и экстрагируют в делительной воронке трижды по 25 мл гексана. Гексановые экстракты объединяют.
2.6.3.6. Выделение тиокарбаматов, трефлана и линурона
Отделение тиокарбаматов, трефлана и линурона производится от коэкстрактивных веществ перегонкой с водяным паром.
Гексановый экстракт после п. 2.6.3.2 упаривается на ротационном испарителе до объема 10 мл и переносится количественно на слой воды в дистилляционной колбе. Проба кипятится на электроплитке в течение 1 часа. Собранный водный дистиллят экстрагируется трижды по 25 мл гексана.
2.6.4. Концентрирование
Органические экстракты, полученные по п. п. 2.6.3.3 - 2.6.3.6, осушаются безводным сульфатом натрия и упариваются с помощью ротационного испарителя.
2.6.5. Детектирование гербицидов без модифицирования молекул
2.6.5.1. Определение тиокарбаматов и трефлана
К упаренному экстракту после п. 2.6.3.6 прибавляют 1 мл этанола и хроматографируют аликвоту полученного раствора с помощью ДПР и ТИД в условиях, приведенных выше.
2.6.5.2. Определение симазина, атразина и прометрина
К упаренным по п. п. 2.6.3.3 - 2.6.3.5 экстрактам прибавляют по 1 мл ацетона и хроматографируют аликвоту полученного раствора с помощью ТИД в условиях, приведенных выше.
Однако, учитывая, что около 5% атразина после перераспределения в системе гексан - ацетон - 1 н раствор едкого натра остается в водно-ацетоновой фазе, в случаях больших концентраций атразина он может быть в дальнейшем идентифицирован ошибочно как симазин. Это вызвано тем, что на колонке с 5% SE-30 симазин и атразин практически не разделяются. Для решения задачи идентификации следует воспользоваться альтернативной колонкой, содержащей 5% XE-60. В тех же температурных режимах, что и для колонки с SE-30, симазин и атразин имеют разные параметры удерживания.
2.6.6. Модифицирование молекул гербицидов
2.6.6.1. Получение метиловых эфиров 2,4-Д и дикамбы
Упаривают этилацетатный экстракт (2.6.3.4) и к сухому остатку прибавляют 3 - 5 мл эфирного раствора диазометана. Через 10 - 15 мин. диазометан удаляют током воздуха и вводят аликвоту в хроматограф.
2.6.6.2. Определение бетанала, пирамина и линурона
2.6.6.2.1. Гидролитическое расщепление
К упаренным пробам после п. 2.6.3.3 и 2.6.3.6 добавляют 1 мл диэтиленгликоля, содержащего 4% KOH, и выдерживают на масляной бане при 180 °C в течение 15 мин.
2.6.6.2.2. Бромирование
К охлажденной смеси прибавляют 10 мл 1 н раствора серной кислоты, 0,5 мл 0,2% раствора мезидина, 0,5 мл 20% раствора бромида калия и 0,5 мл 1% раствора бромата калия. Содержимое тщательно перемешивают и помещают на 15 мин. в темное место. По окончании бромирования избыток брома удаляют небольшим количеством сульфита натрия безводного.
2.6.6.2.3. Выделение бромпроизводных
Раствор подщелачивают 10 н раствором едкого натра (около 1,5 мл) и экстрагируют 5 мл толуола. Аликвотную часть хроматографируют.
2.7. Обработка результатов анализа
Для определения препаратов методом абсолютной калибровки прежде всего определяют калибровочный коэффициент для каждого соединения по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = - x (------- + ------- + ... + -------),
n c x V c x V c x V
1 1 2 2 n n
где:
n - число вводимых проб стандартных растворов;
H - высота пиков вещества, мм;
c - концентрация стандартных растворов, мкг/мл;
V - объем, вводимый в хроматограф, мкл.
Расчет содержания препарата в объекте производится по формуле:
H x V
1
X = ----------,
K x V x A
2
где:
X - количество препарата в объекте, мг/кг;
H - высота пика препарата, мм;
V - объем анализируемой пробы, мл;
1
K - калибровочный коэффициент, мм/нг;
V - хроматографируемый объем, мкл;
2
A - навеска пробы, г.
2.8. Техника безопасности
Необходимо соблюдать правила безопасной работы при использовании легковоспламеняющихся жидкостей (органические растворители), кислот и щелочей, токсических веществ (гербициды, гидразин-гидрат, мезидин), а также метанола.