Утверждены
Минздравом СССР
27 апреля 1984 г. N 3011-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕВРИНОЛА В ПОЧВЕ, РАСТЕНИЯХ И
ЭФИРНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Ю.С. Барановым, Л.А. Хилик (ВНИИЭМК).
Краткая характеристика препарата. Действующее начало девринола -
альфа(нафтил-1-окси)пропионовой кислоты диэтиламид. Брутто-формула
C H NO . Молекулярная масса 271,4. Общепринятое название - напропамид,
17 21 2
торговое название - дэпра. В чистом виде розовый кристаллический порошок с
т. пл. 69 °C. Растворимость в воде 70 мг/л при 20 °C, хорошо растворяется в
-3
ацетоне, этаноле, хлороформе. Давление насыщенного пара 1,2 x 10 -
-4
5,3 x 10 Па. Выпускается в виде смачивающегося порошка.
Принцип метода. Метод основан на извлечении девринола из растений, почвы ацетоном, очистке экстрактов - перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с оксидом алюминия и газохроматографическом определении с помощью ТИД. Из эфирных масел препарат извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют газожидкостной хроматографией.
Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 1,0 нг. Остальные параметры приведены в таблице 67.
Таблица 67
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕВРИНОЛА
┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐
│ Параметры │ Анализируемый объект │
│ ├────────┬──────────────┬────────┤
│ │почва │эфиромасличные│эфирные │
│ │ │ растения │ масла │
│ │ │ │ │
├────────────────────────────────────────┼────────┼──────────────┼────────┤
│Нижний предел определения, мг/кг │0,02 │0,04 │0,2 │
│Среднее значение определения, % │88,8 │88,7 │83,8 │
│Относительное стандартное отклонение │5,3 │3,8 │5,0 │
│Доверительный интервал среднего │+/- 14,7│+/- 10,6 │+/- 13,8│
│(p = 0,95, n = 5), % │ │ │ │
└────────────────────────────────────────┴────────┴──────────────┴────────┘
Избирательность метода. Метод селективен. Прочие пестициды, используемые на плантациях лаванды и мяты, определению не мешают.
Реактивы и растворы. Диметилсульфоксид х.ч. Ацетон особой чистоты. н-Гексан ч., свежеперегнанный. Ацетонитрил ч. Оксид алюминия для хроматографии, ч., II степени активности. Сульфат натрия безводный х.ч. Диэтиловый эфир (для наркоза). Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% XE-60. Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30.
Стандартные растворы девринола в ацетоне с содержанием 100 (раствор N 1), 10 мкг/мл (раствор N 2). Растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.
Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Делительные воронки на 250 и 500 мл. Колбы: плоскодонные, конические на 250 мл; круглодонные на 100 мл; мерные на 100 мл. Цилиндры мерные на 100 мл. Микрошприцы на 1 и 10 мкл. Пипетки на 1 и 10 мл. Колонки для хроматографии размером 100 x 15 мм.
Подготовка к определению. Органические растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в режимных условиях в течение 2 ч.
Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы массой 100 г, растений эфиромасличных культур - 50 г, эфирного масла - 10 г.
Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченной и просеянной через сито почвы (100 г) помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют в течение 1 ч с помощью механического встряхивателя, оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл. Остаток на фильтрате дважды промывают ацетоном порциями по 30 мл. Фильтрат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до объема 10 мл. Остаток количественно переносят в делительную воронку на 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют девринол н-гексаном трижды порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.
Свежесрезанные эфиромасличные растения (массой 50 г) гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 - 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 - 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора трижды промывают ацетоном порциями по 20 мл и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Упаривают ацетон на ротационном вакуумном испарителе до 10 мл при температуре бани 50 °C. Остаток количественно с 50 мл ацетонитрила переносят в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана. Встряхивают 1 - 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию проводят еще дважды. Нижний слой переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 250 мл 10-процентного сульфата натрия и трижды реэкстрагируют девринол н-гексаном порциями по 50 мл. Собирают верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская через безводный сульфат натрия, и упаривают до 5 мл на ротационном испарителе. Остаток переносят на колонку с 6 г оксида алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). После того как раствор полностью впитается в слой сорбента, отгонную колбу смывают 5 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1) и переносят на колонку. Операцию повторяют 3 раза. Девринол элюируют 100 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). Элюат упаривают на ротационном испарителе досуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.
Навеску эфирного масла мяты, лаванды, шалфея (10 г) помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида и выдерживают 20 мин. для растворения. Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивают 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию повторяют еще дважды. Оставшийся раствор переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 200 мл 10-процентного сульфата натрия, предварительно насыщенного 15 мл серного эфира, и реэкстрагируют девринол серным эфиром трижды порциями по 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат, пропуская через безводный сульфат натрия, и концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона, встряхивают и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.
Условия хроматографирования. Используют стеклянные колонки спиральной
формы длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Расход газа-носителя
40 мл/мин.; водорода - 16; воздуха - 400 мл/мин. Температура (°C):
испарителя - 230, термостата колонок - 190. Хроматографируемый объем 2 мкл.
Линейный динамический диапазон 1 - 1000 нг. Рабочая шкала электрометра
-12
100 x 10 А. Время удерживания девринола на SE-30 8 мин., на XE-60 -
11 мин.
Обработка результатов анализа. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
HV
1
X = ----,
KV P
2
где:
H - высота пика препарата и анализируемой пробе, мм;
V - объем анализируемой пробы, мл;
1
V - объем инъектируемой пробы, мкл;
2
P - масса навески, г;
K - калибровочный коэффициент, определяемый по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = - (--- + --- + ... + ---),
n CV CV CV
1 2 n
где:
H , H , H - высоты пиков стандартного раствора девринола, мм;
1 2 n
V , V , V - объемы стандартного раствора девринола, вводимые в
1 2 n
хроматограф, мкл;
C - концентрация стандартного раствора (10 мкг/мл).
Содержание микроколичеств девринола в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.
Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса опасности (девринол), а также с легколетучими растворителями.