Утверждены
Минздравом СССР
14 июля 1988 г. N 4670-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГЕТЕРОФОСА В РАСТЕНИЯХ ЛАВАНДЫ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препарата приведена в Унифицированной методике.
Принцип метода. Метод основан на извлечении гетерофоса из измельченного растительного материала экстрагентом (смесь ацетона с 0,05 н хлоридом кальция в соотношении 1:1), перераспределении в н-гексан и определении методом ГЖХ с ТИД.
Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество гетерофоса 0,1 нг. Нижний предел определений в растениях лаванды 0,01 мг/кг. Среднее значение определения 82,1%. Стандартное отклонение 5,7%. Доверительный интервал (p = 0,95, n = 9) +/- 4,6%.
Избирательность метода. Метод селективен в присутствии хлорорганических и фосфорорганических гербицидов, рекомендованных на лаванде.
Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Сульфат натрия безводный ч. Хлорид кальция 0,05 н, ч. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60. Стандартный раствор гетерофоса с содержанием 10 мкг/мл, срок хранения 6 мес.
Приборы и посуда. Хроматограф газовый с ТИД "Цвет-106", "Цвет-164" и др. Аппарат для встряхивания. Весы лабораторные. Ротационный вакуумный испаритель. Воронки делительные. Колбы: плоскодонные конические; грушевидные остродонныемерные на 100 мл. Пипетки на 1 и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М.
Подготовка к определению. Органические растворители перед началом работы следует очистить по соответствующим методикам и перегнать, сульфат натрия прокалить при 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку кондиционировать в течение 2 ч при режимных условиях.
Ход анализа. Свежесрезанные растения лаванды (50 г) гомогенизируют со 150 мл смеси ацетона с 0,05 н хлоридом кальция (1:1), встряхивают 30 - 40 мин. Смесь фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора промывают трижды порциями по 20 мл смеси и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Фильтрат переносят на делительную воронку вместимостью 500 мл, где экстрагируют гетерофос хлороформом (трижды порциями по 50 мл). Нижний слой собирают, высушивают, пропуская через 50 г безводного сульфата натрия, и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в испаритель газового хроматографа.
Условия хроматографирования. Используют стеклянные колонны в форме спирали длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Расход газа-носителя 40 мл/мин., водорода - 30, воздуха - 150 мл/мин. Температура (°C): испарителя - 220, термостата колонок - 160. Хроматографируемый объем 2 мкл.
Линейный динамический диапазон 0,1 - 100 нг. Рабочая шкала
-12
электрометра 100 x 10 А. Время удерживания гетерофоса на
колонке с 3% SE-30 - 12 мм, с 5% XE-60 - 17 мм.
Обработка результатов анализа. Количество препарата в
анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
HV
1
X = ----,
V KA
2
где:
V - объем анализируемой пробы, мл;
1
V - объем инъектируемой пробы, мкл;
2
H - высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;
A - навеска, г;
K - калибровочный коэффициент, который определяют по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = - (--- + --- + ... + ---),
n CV CV CV
1 2 n
где:
H , H , H - высоты пиков стандартного раствора гетерофоса,
1 2 n
мм;
V , V , V - объемы стандартного раствора гетерофоса, вводимые
1 2 n
в хроматограф, мкл;
C - концентрация стандартного раствора гетерофоса, мкг/мл.
Содержание гетерофоса в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.
Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучими растворителями.