Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 4975-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ИЗОФЕНА И ДИНОСЕБА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препарата дана в Методических указаниях N 4709-88.
Изофен - высокотоксичное соединение. В воздухе рабочей зоны может находиться только в виде аэрозоля. Обладает слабым кожно-резорбтивным действием. ОБУВ изофена в воздухе 0,2 мг/куб. м.
Диносеб - полупродукт производства изофена. В воздухе рабочей зоны может находиться в виде аэрозоля. Высокотоксичен. Активно всасывается через кожу. В больших дозах влияет на дыхательный центр и сердечную мышцу. Есть указание на его тератогенное и эмбриотоксическое действие. ПДК в воздухе рабочей зоны 0,05 мг/куб. м.
Принцип метода. Определение основано на хроматографировании изофена и диносеба в тонком слое сорбента с последующим обнаружением зон локализации пестицидов в виде бутилдинитрофенолятов при обработке хроматограмм раствором спиртовой щелочи и термическом разложении изофена до диносеба. Отбор проб с концентрированием (фильтр АФА-ВП-10 и пенополиуретановая пробка).
Метрологическая характеристика метода. Предел измерения в хроматографируемом объеме пробы изофена 0,5 мкг, диносеба - 0,2 мкг. Предел измерения в воздухе (при отборе 100 л воздуха) изофена 0,1 мг/куб. м., диносеба - 0,025 мг/куб. м. Диапазон измеряемых концентраций изофена 0,1 - 6,0 мг/куб. м, диносеба - 0,025 - 2,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности не превышает +/- 15,5%.
Избирательность метода. Определению не мешают полупродукты получения изофена, в том числе изопропилхлоркарбонат, изопропиловый спирт, фосген, а также другие пестициды. Селективность метода обеспечивается сочетанием систем подвижных растворителей.
Реактивы, растворы и материалы. Гексан ч.д.а. Свежеперегнанный. Ацетон х.ч. Этиловый спирт-ректиф. Ледяная уксусная кислота ч.д.а. н-Гептан эталонный. Гидроксид калия ч., 6-процентный раствор в этиловом спирте. Пластинки "Силуфол". Фильтры АФА-ВП-20. Изофен с содержанием основного вещества не менее 95%. Диносеб с содержанием основного вещества не менее 95%. Стандартные растворы изофена и диносеба с содержанием 100 мкг/мл. Стандартные растворы готовят, растворяя 100 мг изофена или диносеба в гексане в мерной колбе вместимостью 100 мл. Стандартные растворы изофена и диносеба стабильны при хранении в холодильнике в течение одного года в условиях исключения испарения растворителя.
Приборы и посуда. Камера хроматографическая или аналогичная. Аспирационное устройство. Фильтродержатель. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы: мерные на 100 мл; грушевидные на 25 мл. Бюксы стеклянные. Пипетки на 0,1; 1; 5; 10 мл с делениями. Пробирки градуированные с пробками на шлифах. Цилиндры мерные вместимостью 100 мл. Микрошприц на 100 мкл. Химические стаканы вместимостью 50 мл. Сушильный шкаф.
Отбор проб. Воздух со скоростью 10 л/мин. протягивают через фильтр АФА-ВП-20, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ОБУВ изофена и 1/2 ПДК диносеба следует отобрать 100 л воздуха. Пробы, отобранные на фильтр, можно хранить в закрытых бюксах при комнатной температуре в течение недели.
Ход анализа. Подготовка хроматографических камер. Хроматографические камеры заполняют системой подвижных растворителей гексан - ацетон - ледяная уксусная кислота (20:5:1) или н-гептан - этилацетат (4:1) за 1 ч до начала хроматографирования. Уровень подвижного растворителя в камере не должен превышать 0,7 - 1,0 см над уровнем дна.
Подготовка проб к анализу. Фильтр из фильтродержателя переносят с помощью пинцета в бюкс. Содержимое бюкса заливают 5 - 7 мл гексана, дают постоять несколько минут, а затем с помощью стеклянной палочки многократно отжимают фильтр в растворителе, после чего гексан переносят в грушевидную колбочку вместимостью 25 мл. Последние капли растворителя отжимают стеклянной палочкой. Фильтр еще 3 раза промывают гексаном порциями по 3 - 4 мл и каждую порцию полученного раствора переносят в грушевидную колбочку. Из объединенного гексанового раствора с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана, колбочку закрывают пробкой на шлифе и стенки колбы тщательно обмывают растворителем.
Хроматографирование. На пластинку "Силуфол" с помощью микрошприца или микропипетки наносят аликвотные части раствора 0,05 мл (50 мкл) при определении изофена или 0,08 мл (80 мкл) при определении диносеба. Справа и слева от рабочей пробы на пластинки наносят по 0,05 мл из шкалы стандартов изофена с содержанием 0,5; 0,7; 0,9; 1; 2; 3 мкг или по 0,08 мл из шкалы стандартов диносеба с содержанием 0,2; 0,40,6; 0,8; 1; 2 мкг (табл. 187).
Таблица 187
ШКАЛА СТАНДАРТОВ
┌───────────────────────────────┬─────────────────────────────────────────┐
│ Растворы и растворители │ Стандарты │
│ ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┤
│ │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │
├───────────────────────────────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┤
│ Изофен │
│ │
│Стандартный раствор изофена │1 │1,4 │1,8 │2 │4 │6 │
│(100 мкг/мл), мл │ │ │ │ │ │ │
│Гексан, мл │9 │8,6 │8,2 │8 │6 │4 │
│Содержание изофена в растворе, │10 │14 │18 │20 │40 │60 │
│мкг/мл │ │ │ │ │ │ │
│Содержание изофена в 0,05 мл │0,5 │0,7 │0,9 │1 │2 │3 │
│хроматографируемой пробы, мкг │ │ │ │ │ │ │
│ │
│ Диносеб │
│ │
│Стандартный раствор диносеба │0,25 │0,50 │0,75 │1,00 │1,25 │2,50 │
│(100 мкг/мл), мл │ │ │ │ │ │ │
│Гексан, мл │9,75 │9,50 │9,25 │9,00 │8,75 │7,50 │
│Содержание диносеба, мкг/мл │2,5 │5,0 │7,5 │10,0 │12,5 │25,0 │
│Содержание диносеба в 0,05 мл │0,2 │0,4 │0,6 │0,8 │1,0 │2,0 │
│хроматографируемой пробы, мкг │ │ │ │ │ │ │
└───────────────────────────────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┘
Пластинку с нанесенными пробами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до начала хроматографирования наливают подвижный растворитель гексан - ацетон - ледяная уксусная кислота (20:5:1) или н-гептан - этилацетат (4:1). После развития хроматограммы пластинку сушат на воздухе до полного испарения уксусной кислоты, а затем обрабатывают 6-процентным раствором KOH в этиловом спирте.
Диносеб на хроматограмме проявляется сразу же в виде желтых
пятен на белом фоне с R 0,74 +/- 0,05 в первой системе подвижных
f
растворителей и R 0,60 +/- 0,05 - во второй.
f
Изофен на пластинках проявляется после нагревания в сушильном
шкафу при температуре 80 - 90 °C в течение 5 - 7 мин. в виде
желтых пятен на белом фоне с R 0,53 +/- 0,05 и R 0,50 +/- 0,05
f f
соответственно в первой и второй системах подвижных растворителей.
Пятна стабильны в течение длительного времени. Линейный диапазон
определения для изофена 0,5 - 3 мкг, диносеба - 0,2 - 2 мкг.
Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и того стандарта, площадь и интенсивность которого наиболее близки пятну рабочей пробы. Концентрацию изофена или диносеба в воздухе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:
GV
2
X = -----,
V V
1 20
где:
G - количество изофена или диносеба, найденное в
хроматографируемой пробе, мкг;
V - объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл;
1
V - общий объем пробы, мл;
2
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях с пестицидами.