Путь:
Навигация
- Декреты СССР 1917-1992
- Законы СССР 1917-1992
- Инструкции СССР 1917-1992
- Обращения СССР 1917-1992
- Письма СССР 1917-1992
- Положения СССР 1917-1992
- Постановления СССР 1917-1992
- Правила СССР 1917-1992
- Приказы СССР 1917-1992
- Прочие СССР 1917-1992
- Распоряжения СССР 1917-1992
- Указы СССР 1917-1992
- Циркуляры СССР 1917-1992
Язык [ РУССКИЙ ]
Новые материалы
- Бизнес-ланч как организовать обед с выгодой 2024-03-23
- Болезни, которые успешно лечатся в современных клиниках 2024-03-10
- Пополнить Steam Пополнение Счета через Steam 2024-03-05
- 10 способов оптимизации пространства в маленькой ванной 2024-02-03
- Магия звука выберите подходящий музыкальный инструмент для вашего творчества 2024-01-22
- Куда можно поехать отдохнуть в России 2024-01-22
- Преимущества доставки еды комфорт, разнообразие и экономия времени 2024-01-14
- Все что нужно знать о покупке земли 2024-01-14
- NATO-УГРОЗА СТАБИЛЬНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ УКРАИНЫ 2023-12-05
- Займ Бесплатно на Карту Онлайн. Финансовая Гибкость и Удобство в Одном Клике 2023-11-30
- Преимущества краткосрочного займа на карту 2023-11-27
- Украине уже пора снять розовые очки и оценить, что значит война, нацизм и терроризм 2023-11-03
- юрии 0000-00-00
- Понимание основ охраны труда 2023-10-11
- Огурец Кибрия РЦ F1 лучший выбор для плёночных теплиц 2023-10-11
Картинка недели
Указы СССР 1917-1992
Категории
Методические указания по измерению концентрации покоящихся спор энтомофторовых грибов микоафидина, энтомофторина методом световой микр
Дата публикации: До 2014-05-28Просмотров: 652
Материал приурочен к дате: 1984-11-27
Прочие материалы относящиеся к: Дате 1984-11-27 Материалы за: Год 1984
Автор: Мета Гость
Утверждены
Минздравом СССР
27 ноября 1984 г. N 3158-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ПОКОЯЩИХСЯ СПОР
ЭНТОМОФТОРОВЫХ ГРИБОВ (МИКОАФИДИНА, ЭНТОМОФТОРИНА)
МЕТОДОМ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Энтомофторовые грибы, в частности Entomophthora thaxteriana,
используются для производства средств защиты растений
(микоафидина, энтомофторина и др.). В состав микоафидина входят
7
покоящиеся споры указанного вида гриба (не менее 4 x 10 в 1 г),
фрагменты мицелия и остатки питательной среды. Препарат -
мелкодисперсный аморфный порошок желтого или бежевого цвета,
имеющий слабый специфический (грибной) запах. Гигроскопичен. В
воде образует нестойкую суспензию. У энтомофторина состав и
свойства подобны описанным. Токсичность микоафидина и
энтомофторина низкая. ЛД для белых мышей и крыс при введении в
50
желудок превышает 10 г/кг. ПДК (ориентировочная) в воздухе рабочей
3
зоны 5 x 10 спор/куб. м.
Микоафидин и энтомофторин используются в качестве контактных инсектицидов против тлей. Препараты применяют с помощью опрыскивания вегетирующих растений.
Краткая характеристика препарата. Энтомофторовые грибы - эффективное средство борьбы с тлями. Грибы этого рода образуют два вида спор: конидии (инфекционные частицы) и покоящиеся споры, позволяющие сохраняться и выживать в неблагоприятных условиях. Эта стадия гриба используется для получения биопрепарата. Покоящиеся споры получают в массовом количестве в биолабораториях.
Принцип метода. Метод основан на осаждении на аналитические фильтры типа АФА из перхлорвинила, просветлении фильтра в парах ацетона, подсчете покоящихся спор энтомофторовых грибов на фильтрах методом микроскопии в проходящем свете, расчете содержания спор в воздухе.
Метрологическая характеристика метода. Диапазон определения
2 5
количества спор на фильтре 12 x 10 - 6 x 10 . Предел обнаружения
2
5 x 10 спор на фильтре. Среднее значение определения стандартных
количеств спор 82%. Стандартное отклонение отдельного определения
26,1%. Относительное стандартное отклонение 0,2. Доверительный
интервал среднего при p = 0,05 +/- 29,4%.
Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии посторонней микрофлоры, минеральных и органических частиц. Определению мешает избыток пыли на фильтре, если ее количество превышает 3 - 5 мг.
Реактивы и материалы. Ацетон х.ч. Этанол 96-процентный. Диэтиловый эфир (для наркоза). Вода дистиллированная. Мешки полиэтиленовые хозяйственные. Формалин. Фильтры АФА-ВП-20 или АФА-ХП-20. Вата обезжиренная медицинская.
Приборы и аппаратура. Аспирационное устройство. Аллонжи ИРА-2000. Трубки соединительные резиновые. Микроскоп МБИ-3 или аналогичный. Стекла предметные и покровные 24 x 24 мм. Микрометр окулярный винтовой МОВ-1-15. Объект-микрометр ОМП. Кювета металлическая (150 x 100 x 30 мм) со стеклянной крышкой. Баня водяная. Колбы конические на 100 мл.
Подготовка к определению. Отбор, транспортировку, хранение и анализ проб проводят при соблюдении правил асептики. Аналитические аэрозольные фильтры и аллонжи стерилизуют в парах формалина (в полиэтиленовых мешках, завернутыми в бумагу) в течение 24 ч при комнатной температуре. Площадь поля зрения микроскопа определяют при помощи микрометра окулярного и объект-микрометра. Предметные и покровные стекла обрабатывают смесью этанола с эфиром (1:1).
Отбор проб. Споры энтомофторовых грибов улавливают на аналитические аэрозольные фильтры из перхлорвинила путем фильтрации через них исследуемого воздуха. Через фильтр пропускают 500 - 600 л воздуха со скоростью 5 - 20 л/мин. Пробы можно хранить продолжительное время при температуре 2 - 5 °C.
Ход анализа. Фильтр с пробой наносят на предметное стекло (аэрозольными частицами вверх), свисающие части фильтра срезают ножницами. Предметное стекло помещают в металлическую кювету над слоем кипящего ацетона (подогревают на водяной бане, работу проводят в вытяжном шкафу) и накрывают крышкой. Под воздействием паров ацетона фильтр осветляется в течение 5 - 10 с. Предметное стекло извлекают из кюветы, ацетон в течение 10 - 20 с испаряется. Споры на фильтре подсчитывают путем микроскопии в проходящем свете при увеличении 20 x 7 или 20 x 10 в препарате "раздавленная капля". Для этого на просветленный фильтр наносят на 2 участка на расстоянии 30 - 35 мм по одной капле дистиллированной воды и накрывают покровным стеклом. Количество покоящихся спор подсчитывают в 50 полях зрения микроскопа (по 5 x 5 на обоих участках фильтра). Для равномерного обзора всего участка фильтра споры подсчитывают в полях зрения, расположенных не подряд, а с интервалом в 2 - 3 поля. Покоящиеся споры энтомофторовых грибов имеют округлую форму и четко различимую двойную оболочку. В центре споры располагается крупная "жировая капля". Споры имеют размеры от 27 до 50 мкм, а "жировая капля" - 12 - 20 мкм.
Обработка результатов анализа. Концентрацию покоящихся спор энтомофторовых грибов в воздухе (X, спор/куб. м) вычисляют по формуле:
1000Sn
X = -------,
S n V
1 1 20
где:
S - площадь аналитического аэрозольного фильтра (той части,
через которую проходит воздух при закреплении фильтра в аллонже),
кв. мм;
S - площадь поля зрения микроскопа, кв. мм;
1
n - число подсчитанных спор энтомофторовых грибов;
n - число просмотренных полей зрения микроскопа;
1
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л;
1000 - коэффициент пересчета литров в метры кубические.
Требования безопасности. Соблюдаются общие правила по технике безопасности при работе с легковоспламеняющимися жидкостями и электроприборами. Выполняются меры предосторожности, рекомендуемые для работы с условно-патогенными микроорганизмами, сущность которых сводится к предупреждению загрязнения проб и соблюдению правил личной гигиены.
Остальные материалы раздела: Указы СССР 1917-1992
Предыдущая Методические указания по газохроматографическому измерению концентраций 2.4-дихлорфеноксипропионовой кислоты в воздухе рабочей зоны утвСледующая Временные методические указания по измерению концентраций покоящихся спор энтомофторовых грибов микоафидина. энтомофторина методом све