Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N 4354-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СТАРАНЕ200 В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препарата. Старане - 4-амино-3,5-
200
дихлор-6-фтор-2-пиридилоксиуксусная кислота. Брутто-формула
C H FCl N O . Молекулярная масса 255. Общепринятое название -
7 5 2 2 3
флюроксипир. Растворимость при 20 °C: в воде - 0,091, в ацетоне -
41,6 г/л. Химически чистое соединение - белое кристаллическое
вещество без запаха с т. пл. 232 - 233 °C. Старане предлагается
200
в форме концентрата эмульсии, содержащего 200 г флюроксипира в
виде 1-метилгептилового эфира на 1 л. Это послевсходовый гербицид.
Препарат действует подобно ауксину, обычно через несколько часов
после обработки. В высшей степени эффективен как средство защиты
зерновых культур от целого ряда распространенных сорняков и
считается перспективным для уничтожения многолетних сорняков в
плодовых садах.
Принцип метода. Метод основан на извлечении старане из воды, почвы и зерна одним из органических растворителей с последующим хроматографированием в тонком слое стандартных пластинок "Силуфол"и проявлении зон локализации препарата аммиакатом серебра.
Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 158.
Таблица 158
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌────────────────────┬───────────────────┬────────────────┬───────────────┐
│Анализируемый объект│Предел определения,│Среднее значение│ Стандартное │
│ │ мг/л или мг/кг │ определения, % │ отклонение, % │
├────────────────────┼───────────────────┼────────────────┼───────────────┤
│Вода │0,005 - 0,008 │90,0 │+/- 15,5 │
│Почва │0,05 │75,0 │+/- 11,6 │
│Зерно │0,06 │70,0 │+/- 11,6 │
└────────────────────┴───────────────────┴────────────────┴───────────────┘
Примечание. Число параллельных определений 6.
Избирательность метода. Метод специфичен, и другие соединения
при данных условиях хроматографирования определению не мешают.
Однако из всех исследуемых объектов извлекается много
коэкстрактивных веществ, которые при опрыскивании проявляющим
реагентом иногда приобретают тот же цвет, что и зоны локализации
старане. Поэтому мы рекомендуем брать контрольную пробу без
препарата и по величинам R , и разности интенсивности окрашивания
f
и размерам пятен идентифицировать и определять количество
гербицида.
Реактивы и растворы. Аммиак ч.д.а. Ацетон х.ч. Вода дистиллированная. н-Гексан ч. Сульфат натрия ч., безводный. Нитрат серебра х.ч. Этиловый эфир уксусной кислоты х.ч. Этиловый спирт. Хлороформ х.ч. Проявляющий реагентаммиакат серебра (к 0,5 г нитрата серебра прибавляют 5 мл воды, 10 мл 25-процентного водного аммиака и доводят до 100 мл этиловым спиртом). Используют свежеприготовленным. Стандартный раствор старане (200 мкг/мл) в этаноле можно хранить в холодильнике до 3 мес.
Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания проб. Весы
равноплечие ручные; аналитические. Воронки: химические;
делительные. Ротационный вакуумный испаритель. Камера для
хроматографирования. Камера для опрыскивания пластинок. Колбы:
плоскодонные на 100, 250 мл; мерные на 25, 100 мл. Мензурки на 25,
50 мл. Мельница. Микропипетки на 0,1; 0,2 мл. Палочки стеклянные.
Пульверизаторы стеклянные. Сито с отверстиями 0,1 - 1,0 мм.
УФ-установка с ртутно-кварцевой лампой марки ПРК-2, ПРК-4 или
ПРК-7. Пластинки "Силуфол" УФ . Фильтры бумажные.
254
Ход анализа. Экстракция препарата из анализируемой пробы. К 100 мл анализируемой воды прибавляют хлороформ или этилацетат и ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч. Препарат трижды экстрагируют растворителем порциями по 25 мл и через делительную воронку экстракты отделяют. Последние объединяют, высушивают над безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе до 0,1 - 0,3 мл и наносят на хроматографическую пластинку.
Навеску воздушно-сухой почвы (100 г), предварительно просеянной через сито, кладут в термостат при температуре 60 - 75 °C на 1 ч. Затем почву помещают в колбу, заливают хлороформом до покрытия пробы и ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч. Экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия (экстракцию хлороформом по 20 - 25 мл проводят 2 - 4 раза), выпаривают на ротационном испарителе до 0,1 - 0,3 мл и наносят этим же растворителем на хроматографическую пластинку.
К 5 - 10 г грубого помола зерна ячменя, пшеницы прибавляют 70-процентный оводненный ацетон и оставляют на ночь. Отфильтрованный через воронку с ватой экстракт переносят в делительную воронку, куда для извлечения препарата очень осторожно (во избежание образования эмульсии) приливают хлороформ. Проводят экстракцию хлороформом трижды порциями по 15 - 20 мл. Хлороформные экстракты объединяют, проводят через безводный сульфат натрия, выпаривают до 0,1 - 0,3 мл и наносят на пластинку.
Хроматографирование. Пробу количественно переносят на
пластинку "Силуфол". Рядом наносят стандартные растворы с
различным содержанием старане (5 - 10 - 20 мкг). После этого
пластинку помещают в камеру для хроматографирования,
предварительно наполненную свежеприготовленным растворителем. В
качестве подвижной фазы рекомендуются две альтернативные системы:
гексан - ацетон (67:33), R 0,50, или петролейный эфир - ацетон
f
(67:33), R 0,45. После поднятия фронта до 12 - 13 см пластинку из
f
камеры снимают, высушивают на воздухе до полного удаления
растворителей. Проявление зон локализации старане на хроматограмме
проводят указанным проявляющим реагентом. Старане проявляется в
виде коричневого пятна на светло-бежевом фоне пластинки.
В случае проб зерна мы использовали многоступенчатую (3 раза) хроматографию. Пластинку опускали в ту же подвижную фазу после просушивания с целью удлинения фронта разгонки.
Обработка результатов анализа. Количественное определение анализируемых соединений проводится сравнением размеров и интенсивности окраски пятен стандартных растворов и анализируемого гербицида. Содержание старане в исследуемой пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнивании со стандартом, мкг;
P - навеска или объем пробы, г или мл.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила по технике безопасности, обычно рекомендуемые при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.